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ppt-免疫标记的应用与评价.ppt

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ppt-免疫标记的应用与评价

免疫标记的应用与评价;免疫标记的应用;CD34+的分析: 未动员前外周血中CD34+细胞1~4%,CD34+/CD38-细胞1/2500,CD34+/CD38-/CD90+细胞1/10000。 各家单抗不同、操作不一,结果难以比较。 内毒素、单纯化疗(骨髓抑制)、细胞因子、化疗联合细胞因子 等的动员。; ;??? T细胞标记 T细胞及其亚群 T祖细胞(pro-T)的表型为CD34+、TdT+、CD10+、CD7+、未成熟T细胞标志CD3、CD4和CD8。在T细胞发育过程中,CD7是最早出现的T细胞标志,且贯穿表达在整个T细胞分化发育过程中。胸腺细胞要分化发育为有功能的成熟T细胞,细胞表面标志需经历一定的变化过程。;从CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR-→CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR-(即CD4、CD8双阴性)→CD7+、CD1+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+(即CD4、CD8双阳性),最后发育成CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8-、TCR+和CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8+、TCR+单阳性的两群成熟胸腺细胞,然后进入外周淋巴器官和血液,执行免疫功能。;但在正常外周血中通常存在CD3+、CD4+、CD8-(TH/TI),CD3+、CD4-、CD8+(TS/TC),CD3+ CD4+ CD8+和CD3+ CD4- CD8-四种表型不同的T细胞,它们分别占T细胞总数的60%~70%,20%~30%,1%~3%,1%~10%。前三种表型细胞的TCR主要为TCRαβ,而CD4- CD8- T细胞主要表达TCRγδ,他们都执行细胞免疫功能。 ; CD2是绵羊红细胞受体和淋巴细胞功能相关抗原-2(LFA-2),表达于人95%T细胞、50%~70%胸腺细胞和大颗粒淋巴细胞(LGL/NK)的表面。CD3是T细胞表面抗原,表达于成熟胸腺细胞、静息和激活的的外周血T细胞,是鉴定T细胞的重要标志,其胞浆和膜CD3是早期和普通型T细胞白血病的主要分型标记。 ; CD5、CD7是T细胞白血病较特异的标记,也是髓系白血病时最常见的伴随标记。CD15、CD45则是白细胞的共同标记抗体,在淋巴瘤的诊断中有一定的价值。而CD25和CD28主要分布于活化T淋巴细胞表面,为活化T淋巴细胞标志。胸腺细胞、静止T细胞、静止B细胞以及NK细胞表面无表达。主要用于淋巴细胞疾病的免疫分型。外周血淋巴细胞CD25+、CD28+占54%~86% ; 末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)和II类人类白细胞抗原(HLA-DR)的阳性表达对早期T细胞白血病的诊断有重要价值。TCRα???β、γ的基因重排检测有利于恶性T细胞疾病细胞异常克隆存在的确定。 另外,80%~90%和95%以上的NK细胞表达CD16和CD56。用CD3-CD16+CD56+可定义NK细胞。 ;B细胞标记; (3)未成熟(早期)B细胞(immature B cell):CD9、CD10消失,出现 SIgM、CD22。CD20、CD24、CD40、CD72、CD74、CDw78、CD79表达增加。其他新的B抗原CD37、CD2、CDw75、CDw76相继出现。 (4)成熟B细胞(mature B cell):SIgM和IgD同时表达,并出现CR、FcR和丝裂原受体,上述B细胞抗原继续存在。 ; (5)活化B细胞(activated B cell):成熟B细胞被抗原或丝裂原刺激后,成为活化B细胞,继之增生和分化。在此过程伴随表达B细胞激活抗原CD23、CD77、CD80、CD86和其他激活相关抗原如CD25、CD26、CD30、CD69、CD70、CD71、CD38等。膜结合型Ig逐渐减少,分泌型Ig逐渐增加,并可发现Ig基因重链类型转换。 (6)浆细胞(plasma cell):激活B细胞进一步分化成为产生抗体的浆细胞,这时获得PC-1、PCA-1和CD138浆细胞特异抗原,CD85表达增加,CD38抗原再出现。而SIg和上述B抗原消失。CD79仍可存在于胞质中。 ;B细胞上的CD抗原分为:①B细胞限制性(特异性)抗原: CD19、CD20、CD21、 CD22、CD77 和CD79, 它们的表达只限于B细胞上,在鉴别细胞系上是十分重要的标志。②B细胞相关性抗原: CD5、CD9、CD10、CD23、CD24、CD37、CD40、CD53、CD72、CD73、CD74、CDw75、CDw76、CDw78、CD81、CD82、CD83、CD84、CD85、CD86

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