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开 题 报 告 专业：呼吸专业 学校：包头医学院 年级：2014级 姓名：王思萱 导师：王慧敏 包头医学院第一附属医院 论文题目 支气管哮喘患者外周血中CD152、CD137 调节性T细胞的表达 Expression of CD152 and CD137 on T regulatory cells in peripheral blood of bronchial asthma patients 主要内容 1 选题依据 2 研究目的及意义 3 研究方法 4 创新点及查新报告 5 经费预算及实验可行性 6 研究进度 7 部分参考文献 选题依据 支气管哮喘的高发病率 哮喘的发病机制十分复杂 CD152、CD137调节性T 细胞 选题依据 哮喘是一种常见的呼吸道疾病，全球约有3亿患者，我国约有2千万。近20年来，许多国家和地区哮喘的发病率和病死率均呈逐渐上升趋势，给患者家庭和社会造成了沉重的负担。 目前一些研究结果对Th1/Th2平衡失调学说提出质疑，认为它尚不能完全解释哮喘的发病机制 Treg是指能够控制或抑制其他细胞功能的T细胞群体，可以对效应性T细胞产生强大的抑制作用，在自身抗原耐受及预防自身免疫性疾病，调节过敏性疾病过度免疫反应中均起重要作用，是目前免疫学领域研究的热点。 有研究发现CD152（CTLA-4）未能及时上调负性调控T淋巴细胞从而导致T淋巴细胞功能紊乱，可能是哮喘发作的原因之一。 CD137（4-1BB）是近年新发现的肿瘤坏死因子受体超家族的新成员，是一种新的共刺激信号分子，它参与T细胞的活化、分化、增殖、凋亡、信号传导及细胞外粘附。CD137的异常表达与免疫疾病的发生存在某种关系。 研究目的及意义 哮喘治疗新方向 控制症状，改善患者生活质量 支气管哮喘早期预防及诊断 降低疾病发生率 研究的目的及意义 基于CD152、CD137调节性T细胞的表达水平与哮喘的发病机制相关，哮喘目前最有前景的治疗方法可能是通过调整调节性T细胞数量来重新达到免疫稳态。 我们可以推测，通过调节患者体内CD152、CD137调节性T细胞数量可能使哮喘患者获得症状的控制，诱导或抑制Treg生成，可望成为哮喘治疗的一个新方向。 检测外周血CD152、CD137Treg水平，或许可较好的反应出气道炎症的反应过程，利于哮喘的早期诊断，对早期干预治疗可能具有一定的价值 研究对象 所有病例在入选前一个月内未口服或静脉应用糖皮质激素和其他免疫抑制剂 一周内无急性感染，无其他慢性病史。 选择同时期的30例健康志愿者作为对照组，男性15例，女性15例 同期门诊健康体检者，经问诊及常规体格检查排除全身各系统急、慢性疾病，无过敏性疾病史，无长期用药史，肺功能正常。 研究方案 据GINA标准分级，检查肺功能，完成哮喘控制问卷调查 抽取研究对象的外周静脉血10ml，肝素钠抗凝，在超净工作台下提取外周血单个核细胞（PBMC） CD152、CD137调节性T细胞染色：取细胞于流式专用试管中，依次加入胞外抗体CD152-PECy7、CD137-PECy7荧光标记单抗进行标记。 利用流式细胞仪检测外周血 CD152、CD137调节性T细胞的分布 研究方案 采用SPSS 17.0统计软件包进行数据处理 符合正态分布的计量以（ ）表示 多组间比较采用单因素方差分析 组间两两比较采用SNK-q检验 相关分析采用线性相关分析 以P0.05为差异有统计学意义 得出实验结论，分析不同程度哮喘患者其调节性T细胞的表达频率，研究其相关性。 课题创新点 新视角研究哮喘的发病机制 多角度交叉分析其相关性 为哮喘早期防治，降低其发生率开辟新道路 国内外相关研究缺乏 查新结果 在国内中文文献系统中， 未见与课题相同的研究报告 实验的可行性 包头医学院第一附属医院是一所集医、教、研于一体的大型综合性三级甲等医院，综合实力雄厚，患者来源广，涵盖了包头及周边地区，为实验的顺利进行提供了基础。 我院的中心实验室，拥有较为完善的实验仪器及设备，为此课题研究提供了先进的实验设备及条件，保证此次实验的顺利进行。 研究进程 2015.07---2015.12 检索、立题、课题设计 2015.12---2016.08 收集实验标本、整理材料、预实验 2016.08---2017.05 收集整理数据，统计学处理，总结 归纳，撰写论文 2017.