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沙门菌属及检验
* 沙门菌属及检验 第四节 1. 熟悉沙门菌属的的主要生物学特性。 2. 掌握沙门菌属的检验程序和检验方法 3. 掌握肥大反应的概念和原理 4. 了解沙门菌属的致病性。 5. 熟悉变形杆菌的主要生物学特性。 学习目的与要求 沙门菌属(Samonella): 为一大类寄生人和动物肠道内生化反应和抗原构 造相似的革兰阴性杆菌。 分两个种 肠道沙门菌 邦戈沙门菌 肠道亚种 撒拉姆亚种 亚利桑那亚种 豪顿亚种 英迪加亚种 致病种类:即肠道亚种中的十余种可引起人和动物致病,如伤寒沙门菌、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌等。 。 形态与染色 革兰阴性杆菌,有菌毛、均有周鞭毛(除 鸡雏沙门菌外)。 培养特性 普通平板:形成较小,圆、无色透明的 S形 菌落 S S平板:形成产碱型菌落(与志贺菌 相似),可产硫化氢菌落中心变黑。 生化反应 发酵葡萄糖、甘露醇 产酸产气(伤寒沙门菌除外)。 不分解乳糖和蔗糖;大多产生·H2S ; 不分解尿素; I M Vi C: — + — +;赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶阳性。 一、生物学性状 大肠埃希菌 沙门菌 1) O抗原:为脂多糖,耐热,100℃数h不被破坏 种类多;用1、2、3等表示;据其将2200多个血清型的沙门菌分成A、B、C、D……等42组,使人致病的多属于A-F组。刺激机体产生IgM抗体。 2) H 抗原:为蛋白质,不耐热,60 ℃15min即可破坏。沙门菌的H 抗原分两相: 第一相用 a、b、c……表示,其特异性高。 第二相以 1、2、3、等表示,其特异性低为几种沙门 菌所共有。 抗原构造 主要有O、H 、Vi三种抗原 : 具有第一相和第二相的沙门菌称为双相菌,仅有一相的称单相菌。 据 H 抗原 的不同,可分种或型。 3)Vi抗原:即毒力抗原,又称表面抗原。不稳定,加热60或石炭酸处理易被破坏,人工传代后易消失。新分离的少数沙门菌有此抗原,它可阻止O抗原与相应抗体的结合。 抵抗力: 不强, 65 ℃15min、70%酒精 5min可杀死。但在水中可活2~3周,粪便中活1-2月,在冻土中可过冬。胆盐、煌绿及染料对其抑制作用 小(故在选择培养基中加入上述物质抑制杂菌);对氯霉素敏感。 二、致病性与免疫性 致病物质: 1.侵袭力:菌毛帮助细菌黏附肠粘膜上皮细胞 Vi抗原 可阻断相应抗体和补体的作用,抵抗吞噬细胞的吞噬作用。 内毒素:可激活补体系统、吸引白细胞,引起肠道炎症,吸收入血可引起全身中毒,发热、白细胞减少、中毒性休克。 肠毒素:类似于大肠杆菌肠毒素。 2. 所致疾病 1) 肠热症(伤寒和副伤寒):由伤寒沙门菌、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引起。 2)食物中毒(急性胃肠炎):由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌引起,有发热、恶心呕吐、水样泻,严重者致脱水、休克、肾衰而死亡(主见于婴儿、老人等),但,大多2~3天自愈。 3)败血症 :常由猪霍乱沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌等引起。有高热、寒战、贫血等严重症状。多见于儿童及免疫力低下者。 免疫性:主要依靠细胞免疫,牢固。 (一)标本采集 不同疾病、不同病程采集不同标本 伤寒、副伤寒:第1、2周采血;第2、3周采 粪、尿;全程 可采骨髓。 血清学检查:第二周起即可采血清。 败血症:采血。 肠炎:粪便、呕吐物、可疑食物 三、微生物学检查 血液、骨髓 粪、尿、可疑食物 增菌培养 (胆盐葡萄糖肉汤) 分 离 培 养 (SS、EMB、MAC、血平板) 增菌培养 (SF、CN、TT) 37 ℃ 18~24h 可疑菌落 初 步 鉴 定 (涂染检、KIA、MIU、IMViC等生化反应、A-F多价血清凝集) 最 终 鉴 定 肠道杆菌系统生化反应 单价因子血清定血清型 37 ℃ 18~24h 37 ℃ 18~24h 37 ℃ 18~24h (二)检验程序及方法 血清学鉴定: 先做A~F多价O血清的凝集(95%以上的
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