蚕豆病生化设计实验 课件.ppt

;;恶心、呕吐、面色苍白 ;蚕豆病简介;;2、设计实验进一步明确诊断。;高铁血红蛋白还原试验 G6PD荧光斑点试验 红细胞G6PD活性测定;实验原理;主要试剂：0.18mol/L亚硝酸钠-葡萄糖溶液①、 0.4mmol/L亚甲蓝溶液 ②、0. 28 mol/ L 葡萄糖溶液③、混合液 （等量①+②+③）、生理盐水、抗凝剂;实验流程;实验流程;实验流程;;试剂：反应液：G-6-P液1份、NADP液1份、皂素2份、磷酸盐缓冲液3份和蒸馏水3份混匀;实验流程;;试剂：生理盐水、溶血素 、3.8mmol/L NADP 、0.5mol/L Tris缓冲液（pH7.5） 、0.63mol/L氯化镁溶液 、33mmol/L G-6-P液 ;实验流程; G-6-PD活性测定的操作表（Zinkham法 );计算公式：G-6-PD活性（U/gHb） =△A/min×1000/6.22×1020/20× Hb(gL-1) ;结果分析方法;二、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光斑点试验 正常人： 0min斑点无荧光，5-10min出现， 10min荧光最强 临床诊断： 轻度缺陷者：0-10min荧光很弱或不出现 中度缺陷者：10-30min出现荧光 严重缺陷者：30min内不出现荧光;三、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性测定 G6PD缺陷者：G6PD活性较正常平均值低40%以 上即可作出诊断;;; 红细胞膜的破坏;还原型谷胱甘肽 体内重要的抗氧化剂 保护红细胞膜蛋白的完整性 ; ;;我组讨论认为：要想探讨该病发生的分子基础 ，需要对目的基因进行基因结构分析，即DNA序列检测;DNA链的方向是5? → 3?;五、患者体型瘦小与该病症是否有关，为什么？（选答） ;蚕豆病是因为体内缺乏G6PD， G6PD主要影响体内的磷酸戊糖途径 该途径主要生成两种重要的物质即5-磷酸核糖和NADPH;NADPH影响：;综上所述，蚕豆病使得该男孩体内发生糖，蛋白质，脂类物质的代谢障碍，一些重要的生物活动受到影响，加之因疾病带来的一些身体上和精神上的折磨，这些因素使得他的身体比同龄孩子削瘦。;Thank you