ch01植物组织与器官培养-2.ppt

Section 2 植物组织培养技术原理 ;一、定义和类型 （一）概念 p33 植物组织培养是指在无菌条件下，将离体的植物器官（如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子等）、组织（如花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞、生殖细胞等）、胚胎（如成熟和未成熟的胚）、原生质体，培养在人工配置的培养基上，给予适当的培养条件，诱发产生愈伤组织、潜伏芽等，或者长成新的完整植株一种实验技术。;组织培养 VS 细胞培养？;组织培养和细胞培养的区别： p31 1.概念： 组织培养是指从机体内取出组织或细胞，模拟体内生理条件，在体外进行培养，使之生存或生长成组织乃至个体； 细胞培养则是指动植物细胞在体外条件下存活或生长，此时细胞不再形成组织。 2.目的： 对植物而言，组织培养主要是指用于植物快速繁殖的组培技术，而细胞培养主要是以次生代谢产物为目的的大规模细胞培养技术。;（二） 植物组织培养类型 1. 按培养材料的差异： 植株培养 指以具备完整植株形态的材料（如幼苗和较大的植株）作为外植体的无菌培养。 胚胎培养 指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。 ;器官培养 指以植物的根，茎，叶，花，果等器官为外植体的离体无菌培养 组织培养 指以分离出植物各部位的组织（如分生组织，成熟组织），或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的组织培养。 原生质体培养 指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。; 2. 按培养方法的不同： （1）固体培养(solid culture) （2）液体培养(liquid culture) 振荡培养 旋转培养 静止培养;solid culture;liquid culture;二、植物组织培养的意义： 1. 只需要少量材料就能够获得大量的植株 可集约化生产，进行工厂化育苗 2. 可节约大量种子、肥料、耕地 3. 获得无病毒植株－脱毒繁殖 植物生长点附近的病毒浓度很低甚至无病毒。因为该区无维管束，病毒难以进入，所以茎尖培养成为获得无病毒植株的重要途径。 ;4. 新品种选育 通过单倍体育种（花药）、诱发突变、远源杂交，以及细胞???合、基因转移等，已获得了许多新品种。 5. 较少受到环境条件的制约，四季均可生产，且不受地理条件的限制 6. 保护自然环境－珍稀植物资源 7. 可用于生产药物－发状根（长春花碱、紫草宁等）;三、植物组织培养的适用范围 主要适合高档、稀有、珍贵的植物的快速繁殖。 目前，一些转基因技术与试管植物培育结合来改良作物或培育新品种。 ;四、植物离体材料培养的基本原理和步骤 p34 植物组织培养的成功与否取决于以下三个因素 培养基的配制 外植体的性质 人工培养环境 light temperature ;植物组织培养的一般过程如下： （一）实验室准备工作 1. 培养基配制 培养基的成分直接影响到植物离体材料的培养;（1）培养基类型 按培养基的组成分： 富盐培养基 无机盐含量高，元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强缓冲性 MS、LS、BL、BM和ER 高硝态氮培养基 硝态氮含量高、氨态氮含量低 B5、N6和SH;中盐培养基 大量元素无机盐含量为MS一半，微量元素含量提高种类减少 H、Nitsch、Miller等 低盐培养基 无机盐和有机成分含量低，多用于作为生根培养基(RIM) White、Ws、HE等;（2）培养基成分 ①无机盐类Inorganic salts 大量元素Macronutrients： N、P、K、Ca、Mg、S ;微量元素Micronutrients ： Micronutrients are required by plant in μM (or concentrations of less than 100 μg/g dry weight) concentrations. There are eight micronutrients included in most plant tissue cultures, including: Fe、Cu、Zn、Bo、 Mn、 Mo、Co and Cl.;②有机化合物organic compound 糖类 C源，又可维持培养基的渗透压 包括： 二糖－蔗糖、麦芽糖