SARS的实验室检测.ppt

WHO必威体育精装版结论 冠状病毒变种是引起非典病原体 来自13个实验室的科学家16日在日内瓦举行的会议上一致认定了变种冠状病毒的作用。 变种冠状病毒与流感病毒有亲缘关系，但它非常独特，以前从未在人类身上发现，科学家将其命名为“SARS病毒”。 国际间SARS病因学研究进展(诊断) ELISA方法可以检测抗体，但是只能从发病20天的病人检测到，不适于早期诊断； 2. 免疫荧光同样需要发病10天才可检测到,并且需要细胞培养； 3. 实时PCR方法目前尚不成熟； 4. 我国研究出非典快速诊断技术, 2小时即可得结果（4月16日新华网） 　　 标本采集、运输和保藏 病毒分离标本的采集与运送 标本采集的质量及数量直接关系到能否成功分离到病原体，而标本保存与运输是否得当也对病原体分离起重要作用。为提高病毒的分离率，在病人发病早期可每天采集咽拭子或痰液标本。 阿尔茨海默症防治相关知识埃及的金字塔有建造方法动画艾司洛尔在神经外科重症中的应用二级二班防溺水等安全教育 SARS的实验室检测 湖南省疾病预防控制中心 张 红 2003年4月20日 确定病原的原则 要从病人中分离培养出病原。 要有血清学的支持证据，即绝大部分病人的血清应能与所分离的病原反应。 将分离病原感染动物，在动物模型上重复出与临床表现类似的特征。 SARS的病原学研究 第一部分：排除多种传染病 第二部分：排除禽流感 第三部分：衣原体及相关研究 第四部分：冠状病毒 第五部分：国际研究进展 排除多种传染病 鼠疫( plague); 肺炭疽(anthrax); 钩端螺旋体(leptospira); 军团菌(Legionella). 结核菌（tubercle bacillus，TB） 支原体(PPLO) 排除多种传染病 腺病毒（Adenovirus)， 流感病毒(Influenza virus)， 禽流感病毒(Avine influenza virus)， 麻疹病毒(Meals virus)， 副流感病毒(Parainfluenza virus)， 出血热病毒( hemorrhagic fever virus)； 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus)； 肠道病毒（Enterovirus) 排除禽流感 对与香港病人有接触及密切接触的75人，分别采集咽拭子和血清标本进行检测； 其中对67份咽拭子标本接种鸡胚，病毒分离及病原检测均为阴性； 采用半加敏HI法，对75份血清标本进行甲型流感病毒H5和H9抗体测定，结果均为阴性(HI效价1:5）； 用H5引物进行的RT－PCR扩增，结果为阴性； 截止目前所有接触及密切接触的75人均未患非典型肺炎； 结论：福建平潭县未见禽流感及非典型肺炎出现。 流感病毒分离 广东162份病人标本同时接种MDCK细胞和鸡胚仅分离到两株乙型流感病毒但未分离到禽流感病毒（Avian influenza virus)。 2002年11月－2003年1月，广东地区流感监测点共采集529份标本，分离到43株流感病毒，未见禽流感病毒。 全国同期流感监测点共采集3206份标本，分离到294株流感病毒，未见禽流感病毒。 禽流感病毒血清学检测 用美国CDC提供的试剂（1997年）对中山市7例、广州市20例病人的双份血清及1份病人恢复期血清做禽流感病毒（H5N1）血凝抑制实验，除1例恢复期血清为可疑（滴度1：20）其余54份均为阴性（HI效价?10）。此前广东省疾控中心曾对这些标本中的30份（15对)血清标本进行过同样实验,结果相同。 对另外36份恢复期血清的H5N1的血凝抑制实验，显示所有标本均为阴性（HI效价?10）。 对30份健康人血清标本进行血凝抑制实验，结果显示所有标本均为阴性（HI效价?10）。 禽流感病毒的分子生物学检测 对3份尸解肺组织标本用WHO推荐的禽流感病毒基因（M，NP，H5）特异引物进行RT－PCR反应，结果均为阴性； 对8份存在可疑血凝活性（HA）的鸡胚尿囊液和1例咽拭子标本进行H5N1流感病毒全基因组扩增，结果均为阴性。 对1例病人含漱液标本进行H5N1病毒基因扩增，仅M基因为阳性，经与国际基因库（GenBank)比较，显示为甲型流感病毒序列。 衣原体及相关研究 电子显微镜观察 免疫荧光检测 病原体组织培养 组织培养病原体电镜观察 组织培养物的免疫荧光检测 药物敏感性研究 血清学检测 电子显微镜观察 对所收集的来自不同地区、不同医院、死于非典型肺炎的5个病例的标本，电镜观察表明5例肺组织肺泡上皮细胞被破坏，肺泡腔充满渗出液，胞浆内均可见典型的充满衣原体颗粒的包含体，大小不等的原生小体(EB)和网质小体（RB