抗生素类药物的分析讲义.ppt

07/16/96 2. 硫醇汞盐法 ChP 青霉素族 （1）原理 青霉素族 HgCl2 （咪唑） 青霉烯酸硫醇汞盐 HgCl2 咪唑 （2）方法 对照品法 pH 9 计算 例 氨苄西林钠 含量测定 取本品约60mg 置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至 刻度，摇匀，再精密量取5ml，置25ml量瓶中，加硼酸缓冲液2.5ml与醋酐的乙腈溶液（1→50）0.25ml，放置5min后，加咪唑溶液至刻度，摇匀，置60℃水浴中，加热30 min，取出冷却，照分光光度法（附录Ⅳ A ），在325nm的波长处测定吸收度；另取氨苄西林三水合物标准品，按同法测定，计算，即得。 （3）讨论 a. 咪唑催化的水解产率高，硫醇汞盐稳定（≥3h） b. 侧链有-NH2时，需加醋酐先将其乙酰化后才能发生上述反应 pH9 （CH3CH2)2O （4）特点 A、简便快速 B、用标准品对照，重现性良好 RSD≤1% 3. 羟肟酸比色法 USP JP β-内酰胺类 β-内酰胺类 H2NOH·HCl NaOH 羟肟酸衍生物 Fe3+/3 H+ 红色 （五）HPLC法 ChP 头孢菌素类 内标法＋校正因子 外标法 特点： 快速、高效、灵敏 专属性强、重现性好 一法多用（鉴别、检查、含测） 哌拉西宁 原料药药 含量测定 例 色谱条件： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇–0.2mol/L磷酸二氢钠溶液–10％氢氧化四乙基铵溶液–水（400︰50︰3︰547）用磷酸调节pH值至5.5为流动相。检测波长为254nm。 第三节 氨基糖苷类抗生素 链霉素 双氢链霉素 新霉素 卡那霉素 庆大霉素 巴龙霉素 链霉素 链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 苷元 链霉双糖胺 糖 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺 庆大霉素 绛红糖胺 + 脱氧链霉胺 + 加洛糖胺 糖 苷元 糖 绛红糖胺 紫素胺 2-脱氧链霉胺 加洛糖胺 N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺 庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 　庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3 一、结构与性质 （一）碱性 多与硫酸成盐 碱性中心 链霉素 3个 庆大霉素 5个 （二）溶解性 水溶性 （三）UV （四）稳定性 链霉素 pH5～7.5 庆大霉素 pH2～12 稳定 （五）链霉素水解产物反应 葡聚糖凝胶G-10 254nm 检 测 流动相B： 0.01%十二烷基 硫酸钠溶液 头孢他啶 对照品溶液 AR 外标法计算，本品含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得超过0.3% 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查 头孢呋辛酯A，B异构体之间、头孢呋辛酯A异构体与头孢呋辛酯△2-异构体之间的分离度应大于1.5； 色谱条件： ODS分析柱； 0.2mol/L磷酸二氢铵-甲醇（62:38）为流动相； 流速1ml/min； 检测波长278 nm。 系统适用性试验： 理论板数按头孢呋辛酯A异构体峰计算，应不低于1500。 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 40 0 20 60 0 30 20 10 时间(min) 峰高(mAU) 6 5 4 A异构体 B异构体 1 13.954 11.919 2.401 B异构体峰的相对保留时间约为0.85， A异构体峰的相对保留时间为1.0。 供试品色谱图中, A异构体峰的面积与A、B异构体峰的面积和之比应为0.48～0.55。 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 异构体 供试品溶液：0.2mg/ml(流动相溶） 对照溶液:供试品溶液，加流动相稀释成6?g/ml 对照溶液进样20?l ，调节仪器灵敏度，使主成分峰高约为记录仪满量程的10% 取供试品溶液和对照品溶液各20?l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2.5倍 供试品溶液如显杂质峰，量取各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主峰的面积 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 四、含量测定 （一）碘量法