PPT课件-免疫球蛋白[精品].ppt

第七节 多克隆和单克隆抗体 一、多克隆抗体（Poly-clonal abtibody,PcAb) 用抗原免疫动物后得到的动物血清（抗血清），是由体内分别针对抗原物质上的多个抗原决定簇的多个B细胞克隆发生应答后产生的，因此叫～。 * 二、单克隆抗体（Mono-clonal antibody，McAb) 通常是指由一株B淋巴细胞杂交瘤增生而成的单 一细胞克隆所产生的一种高度均一、高度专一性的抗 体。 * 原理： 制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中去分离纯化取得，而是用分离产生抗体的B细胞克隆的方法得到。 制备单克隆抗体的技术又叫杂交瘤技术。是G. K?hler和 Milstein于1975年创立。 小鼠免疫脾细胞可以产生抗体但不能在体外无限增殖和传代，小鼠骨髓瘤细胞可在体外无限增殖和传代并能低温保存，借助化学手段将两种细胞融合后所形成的杂交瘤细胞，继承了两种细胞的特性，即既能产生抗体、又能无限增殖。 进一步将杂交瘤细胞稀释分离成单个细胞后再使其培养增殖，即刻得到能针对一种抗原决定簇的单克隆杂交瘤细胞； 最后将此细胞接种到小鼠的腹腔中，就可从培养上清液或腹水中大量得到单克隆抗体。 * 聚乙二醇 * DNA合成途径有两种: (氨基喋呤) (胸腺嘧啶) (次黄嘌呤) 5-磷酸核糖焦磷酸+尿嘧啶 * * * 四、基因工程抗体 目的：保留抗体的抗原结合能力、降低生产成 　　　本、易于大规模生产、减小鼠源性成　 　　　份。 基本原理：借助基因工程手段，将编码Ab的基 　　　　　因重组到真核或原核表达载体上并 　　　　　进行表达。 * 思考题： 1、简述免疫球蛋白的基本结构及其主要生物学功 　　能。 2、简述免疫球蛋白分类和分型的依据。 3、何谓Ig的同种型、同种异型和独特型？它们的主要 差异是什么？ 4、试比较各类Ｉｇ的结构及主要的生物学特性和功能。 5、简述免疫球蛋白的生物学活性。 6、抗体多样性是如何形成的？ 7 、何谓单克隆抗体？简述制备单克隆抗体的原理。 8、名词解释：免疫球蛋白、抗体、同种型、 　同种异型、独特型、单克隆抗体、免疫球蛋白超家族 * 4、穿过胎盘和粘膜 IgG：唯一能通过胎盘的Ig，是婴儿获得天然被动免疫的主要原因，主要借助胎盘滋养层细胞表面的Fc?R进行的。 分泌型IgA：sIgA 呼吸道、消化道粘膜 粘膜局部免疫 5、免疫调节 通过 * 第五节 各类免疫球蛋白的特性及功能 1、IgG 　 2、IgM　 3、IgA　 4、IgD 　 5、IgE * 第五节 各类免疫球蛋白的特性及功能 1、IgG 浆细胞合成，单体形式存在于血清和其它体液中，婴儿出生后三个月开始合成； 含量最高，占血清Ig总量的3/4，达6~16g/L； IgG1/2/4半衰期最长，达23天； 是主要的抗感染抗体，是再次应答的主要抗体； 是唯一能穿过胎盘的抗体（IgG1/3/4）； 激活补体、 ADCC、调理吞噬作用（IgG1/3） 。 * 2、IgM 由5个单体借一个J链和若干二硫键连接形成的5聚体，分子量最大，又称巨球蛋白； 主要分布于血液中，占血清总Ig的1/10； 是个体发育中出现最早的抗体，胎儿晚期合成； 感染后最早出现，半衰期短，一旦出现提示有近期感染； 胎儿有无宫内感染的重要观察指标； 杀菌、溶菌、调理吞噬、激活补体的能力最强。 * 3、IgA 包括血清型和分泌型两种，前者由肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生，多数以单体形式存在，含量2~5g/L，占血清总10%~15%； 分泌型IgA由两个单体、一个J链和一个分泌片组成，主要分布于各种粘膜表面和唾液、泪液、初乳中，参与机体的粘膜局部抗感染反应； 婴儿出生后4~6个月开始合成，但能从母乳中获得； 血清型IgA具有中和毒素、调理吞噬的作用。 * * 4、IgD 以单体形式存在于血清中，含量低，仅占血清总Ig的0.2%； 分子结构类似于IgG，但不能通过胎盘，也不能激活补体； 表达在B细胞膜上的smIgD是成熟B细胞的重要标志，参与B细胞的活化、增殖和分化； 血清中的IgD功能不清。 * 5、IgE 是种系进化过程中最晚出现、含量最少的Ig； 由粘膜下淋巴组织中的浆细胞合成分泌； 血清IgE为单体，结构上重链区比IgG多一个CH4功能域； 亲细胞抗体：特异性IgE通过Fc段的CH3/CH4功能域同位于肥大和嗜碱性粒细胞表面的Fc?R结合，参与I型超敏反应的发生； 可通过ADCC效应特异性杀伤寄生虫。 * 第六节　免疫球蛋白基因的结构和抗体多样性 一、免疫球蛋白的基因结