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细胞活力分析测试
细胞活力分析测试
测试自由基或其他活性物质的产生
ABEL细胞活力测试 (PHOLASINTM )
ABELTM (发光测试分析)细胞活性分析试剂盒针对检测全血和分离的细胞中产生的
白细胞性的自由基和其他活性物质。这发生在超氧化物产生的NADPH氧化酶系统激活过程
中,称之为呼吸爆发。这个测试也可以用于检测其他类型的包含NADPH氧化系统的细胞的
超氧化物的产生(如纤维原细胞,),同样可以用于如黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶等酶系统产生的
超氧化物分析。此外,此试剂盒能够被用于检测白细胞脱粒和确定倾向于脱粒的细胞。
这些独特的化学发光分析仅需要 1µl 的全血或几千个细胞就可以,并在10分钟内完成。
试剂盒包含有独特的发光蛋白PholasinTM ,细胞刺激剂PMA和fMLP ,以及配置和测
试所需的缓冲液。针对全血测试的试剂也包含有血稀释缓冲液和稀释管,并有佐剂增强发光
信号。
细胞活性测试试剂盒简单易用,快速,超敏感(能用于毛细管血),化学发光测试实
时的自由基产生和脱粒。
它们能用于:
测试白细胞的呼吸爆发;
研究 NADPH 氧化酶的异常,如发生在不同类型的 CGD 和多种多样
性中
区分受体活性和细胞内 NADPH 氧化酶活性;
检测 NADPH 氧化酶对感染,发炎和医学干涉等的活性变化,因此可
应用于:
生物相容性监测
药物评估和测试
疫苗的 QC
外科
疾病管理
评估在化疗,移植后的嗜中性粒细胞的活性
监测髓过氧化物酶的脱粒;
超敏感检测多种细胞,如脑细胞,产生的自由基和氧化物。
NADPH 氧化酶在激活时形成一个蛋白复合物,在细胞膜内侧组装。这有一个超氧化
物的连续流,它是通过细胞膜到氧的持续的电子转移(从 NADPH)释放到细胞外。这个” 呼
吸爆发” 用于描述上述事件,因为大量的氧(比正常的高 10-20 倍)在葡萄糖氧化成 NADPH
2
的过程中消耗掉了,它的逆反不是通过线粒体的呼吸来进行的。NADPH 氧化酶的膜成分也
发生在次级颗粒膜上,在脱粒过程中次级颗粒膜与其他的颗粒融合,也包括细胞膜。频繁的
脱粒伴随着的是依赖于刺激剂的氧化酶的激活。因为过量的自由基,氧化物和酶释放到细胞
外。那些测试细胞内超氧化物岐化产生的过氧化氢只是对呼吸爆发的一小部分进行了定量测
试。
PholasinTM 的介绍
PholasinTM 是来自海洋岩生的生物发光软体动物—Pholas dactylus 的发光蛋白。
PholasinTM 自身不会发光,需要有启动剂。白细胞(和其他细胞类型)产生的自由基和其他
的反应氧能够激活PholasinTM 发光。,PholasinTM 能超敏感检测到被激活的白细胞。
PholasinTM 在以下物质存在下能够发光:
自由基:超氧阴离子,单线氧,羟基自由基和/或过渡自由基
氧化物如:次氯酸和次溴酸,氯胺,溴胺和 peroxynitrite
酶:过氧化物酶和特定的氧化酶
临床意义
不同类型的白细胞用不同的途径对不时进入体内的外来细菌和病毒做出反应。一个重
要的反应是负责超氧阴离子(可以转换成过氧化氢)产生的酶系统的激活。这些细胞也可以
正常地释放出含有这些酶的颗粒,产生反应氧类物质如次氯酸和次溴酸。
例如在心脏中,伴随心脏病的是白细胞移除死细胞。这
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