第八章蛋白表达Proteinexpression.ppt

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2018-04-30 发布于河南
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第八章蛋白表达Proteinexpression

第八章原核蛋白表达Protein expression pET蛋白表达系统第一节表达载体 expression vector LacZ 基因位于多克隆位点LacZ at Poly link T7启动子位于多克隆位点上游：T7promoter 核糖体的结合位点RBS T7终止子位于多克隆位点的下游：T7terminator 6个组氨酸(用于吸附纯化）：his-tag LacI基因抑制Lac基因的表达：LacI 第二节宿主细胞Host cell Bl21DE3 容源菌表达T7RNA聚合酶：lysogens expresses T7 RNA polymerae lacI 抑制lac表达:LacI suppress lac expression Plys 相容质粒防止毒素表达：plys suppress toxin producing 第三节表达与纯化expression purification IPTG 诱导表达：IPTG induced expression 六个组氨酸的吸附纯化：affinity 6xhis-tag PAGE凝胶电泳：Protein electrophoresis 蛋白含量分析：protein concentration 小结 * *