A1和A2亚型鉴定标准操作规程.doc

A 1 和A 2 亚型鉴定标准操作规程（SOP）  核心提示：Ａ抗原主要有两种亚血型，称为A?1和A?2（构成全部Ａ型血的99.99%）。在直接凝集反应中，两种红细胞与抗Ａ试剂均发生强的凝集反应。A?1和A?2?间的血清学区别 A 1和A 2（构成全部Ａ型血的99.99%）。在直接凝集反应中，两种红细胞与抗Ａ试剂均发生强的凝集反应。A 1和A 2?间的血清学区别，是依于抗A 1试剂做试验获得的结果为基础。这种抗A 1试剂可为Ｂ型人的血清制成或为双花扁豆提取并稀释的植物凝集素（lectin）在标准试验情况下，抗A 1试剂凝集A 1红细胞，但不凝集A2红细胞。大约80%欧洲人A型或AB型红细胞可被抗A 1所凝集，因此分类为A 1或A 1B；其余20%红细胞为抗A凝集，但不为抗A 1所凝集，故称为A 2或A 2B型。 在常规输血试验中，除非A2或A 2B型人的血清含有抗A 1抗体，患者与供血者间的A 1或A 2不需要加以区别。据估计在血清内发现有抗A 1抗体的频率，A2型人为1%－8%及A 2B型的人为22%－35％。只有在370C有反应的抗A 1，才考虑其具有临床意义，因其能造成红细胞与血清试验间的ABO正反定型不符，且亦可引起交叉配合试验之不相合。 【原理】 根据A B O 血型的血清学特点，A 型和A B 型可分为A 1 、A 2 、A 1B 和A 2B4 种亚型。抗-A （B型人）血清中含有抗B 和抗A 1 两种抗体，抗-A 可以凝集所有A 型和A B 型红细胞，而抗A 1 只能与一部分A 型和A B 型红细胞反应。据此凡与抗A 1 反应者被指定为A 1 或A 1B 型；不与抗A 1 反应，而与抗A 反应者被指定为A 2 或A 2B 型。 【器材】 试管、吸管、载玻片、离心机、记号笔、蜡笔、显微镜 【标本】 外周血或静脉血 【试剂】 1．抗A 1 分型血清 2．受检者5 ％红细胞盐水悬液 3．已知A 1 和A 2 型5 ％红细胞盐水悬液 【操作步骤】 1．取清洁玻片两张，一张测定受检者红细胞用，另一张供对照用，并标明A 1 和A 2 。 2．将抗A 1 分型血清各1 滴分别滴在受检者玻片上和对照的A 1 和A2 部分各1 滴。 3．分别将受检者红细胞悬液及对照用A 1 和A 2 红细胞悬液各1 滴分别滴在上述抗A 1 血清上，用玻棒将血清和红细胞悬液混匀。 4．轻轻转动玻片，在室温下反应10 min 后观察结果。 【 结果判断】 A 1 对照红细胞凝集，而A2 对照红细胞不凝集，即受检者红细胞凝集者为A 1 型，不凝集者为A 2 型。 ※各亚型的抗原抗体及其与抗血清的反应※ 血　型 红细胞上的A、B抗原 血清中的抗体 与血清的反应 与抗A 与抗B 与抗A1 A1 A1和A 抗Ｂ　抗Ｈ（偶见） ＋ － ＋ A2 A 抗Ｂ，抗Ａ（１－２％） ＋ － － A1B A1　Ａ和Ｂ 抗Ｈ（偶见） ＋ ＋ ＋ A2B Ａ和Ｂ 抗A1（２５％）* ＋ ＋ － Ｂ Ｂ 抗Ａ，抗 A1 － ＋ － Ｏ 无 抗Ａ，抗A1，抗Ｂ － － － *指２５％的A2B型血清中含抗A1，　＋　凝集，－　不凝集 【质量控制】 1．A 1 与A 2 红细胞究竟为质的不同还是量的不同，各有依据。因此，检查时必须掌握反应时间。 2．如A 1 和A 2 对照红细胞都凝集，表示抗A 1 血清有问题：如A 1 和A 2 对照红细胞都不凝集则再观察一些时间，如始终不显凝集，也说明抗A 1 血清有问题。 3．新生儿红细胞A B O 血型抗原较弱、不宜作亚型鉴定。