遗传学设计性实验方案.doc

遗传学设计性实验方案实验课题：果蝇有关性状的遗传学分析一、目的和要求：1掌握处女果蝇和雌雄果蝇的选取方法；2掌握果蝇的性状遗传分析方法3了解由性染色体上基因所控制的性状分离规律；4要求能独立查阅相关资料，要求每组做正反交，并进行预假设和适合度检验。5掌握实验结果的统计分析方法二、实验材料、试剂及仪器（1）实验材料：长翅白眼、残翅红眼果蝇、玉米粉、糖、琼脂、酵母粉（2）实验试剂：乙醚、苯甲酸、水（3）实验仪器：试管白瓷板、毛刷、小烧杯、显微镜、解剖针、玻璃棒、量筒、电炉、旧报纸、高压蒸汽灭锅、试管架、标签纸橡皮筋、万分之一天平、麻醉瓶、培养瓶、培养皿、胶带、棉球三、实验方法1、培养基的制备A、称量，配方及用量如下:00ml） 蒸馏水 480ml 玉米粉 68g 糖 52g 琼脂 8.0g 丙酸（苯甲酸） 4.0ml (2.0g) 酵母粉 少许  B、溶解（一部分煮玉米粉，一部分溶琼脂）C、分装 按要求将配置的培养基分装到试管，并标号为1—10号D、加棉塞、包扎E、高压蒸汽灭菌加水——装物——加盖——排气——加热（121摄氏度20分钟）——取物2、取材????????取亲本果蝇即野生型和白眼残翅型，并将原种瓶中的成虫全部清除。3、果蝇的饲养将装有果蝇的试管放在阴暗室温下饲养4、处女蝇的鉴别与收集此后隔6个小时收集刚羽化的成虫，并麻醉，将准确鉴别的雌性和雄性果蝇分别放入1号（）和2号（）试管中备用。（注：腹部背面有五条黑条纹：腹部背面有三条黑条纹，最后一条极宽，并延伸到腹面）5、杂交将1号管中的雌蝇麻醉后用鉴别雌性蛹的方法分离出处女蝇，并将长翅白眼处女蝇放在3号试管中，将残翅红眼处女蝇放在4号试管中。处女蝇与雄果蝇正反交。按下述将2号管中相应雄蝇分离出来分别放入3、4号管中。? 正交：长翅白眼（）X残翅红眼（）? 4对? （置于3号试管）? 反交：残翅红眼（）X长翅白眼（）? 4对? （置于4号试管）分别培养得到F1，贴上标签（注明亲本表现型、 杂交日期、实验者姓名）将F1培养7天后，待幼虫出现后移去亲本果蝇（记录日期），再过4天取出F1 观察其表型（眼色、翅形）统计各种性状，并挑出F1的处女蝇（置于5号试管）和雄果蝇（置于6号试管）F1的处女蝇（置于号试管）和雄果蝇（置于号试管）7天后移去F1成虫果蝇将6对F1雌雄蝇（置于号试管）做兄妹交将6对F1雌雄蝇（置于号试管）做兄妹交（注明亲本表现型，日期，实验者姓名）6～7d后清除F1代（记录日期）。3～4d后，F2代成蝇出现，连续观察统计各种性状及性别比例，F3代出来后停止统计。进行遗传分析6、结果预估及分析1、长翅白眼（）X残翅红眼（）?? 2、残翅红眼（）X长翅白眼（） ?????????????? ?? ???↓ F1: 红眼长翅（雌性）：白眼长翅（雄性）????? 雌雄全部为 红眼长翅?????????? 1??? ： 1????????????????????????↓ ↓ F2:?长翅红眼（）3|16? 长翅红眼（）3|16? 长翅红眼（）6|16长翅红眼（）3|16长翅白眼（）3|16 长翅白眼（）3|16??长翅白眼（）3|16残翅红眼（）2|16残翅红眼（）1|16? 残翅红眼（）1|16??残翅红眼（）1|16? 残翅白眼（）1|16?????残翅白眼（）1|16? 残翅白眼（）1|16 长翅红眼:长翅白眼:残翅红眼:残翅白眼????? 长翅红眼:长翅白眼:残翅红眼:残翅白眼3 : 3 : 1 : 1 ???? 9 : 3 : 3 : 1如实将各代正反交的结果填入表格。将记录结果整理，分别做X2测验，看其是否符合遗传规律。记录好放飞时间（亲代和F1代），对结果进行分析。?长翅白眼（）X残翅红眼（）残翅红眼（）X长翅白眼（）长翅眼长翅白眼残翅红眼残翅白眼长翅红眼长翅白眼残翅红眼残翅白眼χ2检测表 F2表型 长翅眼 长翅白眼 残翅红眼 残翅白眼 实验观察数（O） 理论数（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E  χ2=∑（O-E）2/E χ2的定义为：?? O是实测值E是理论值S是各项比值的总和确定实得结果跟假设有显著性差异的概率水平：?? 当P＜0.05时，存在显著性差异；?? 当P＜0.01时，存在极显著差异；?? 当P≤0.05时，没有显著性差异。四、注意事项1、 麻醉剂的使用