结核病痰涂片及 质量保证推荐.ppt

2、检查步骤：现场评价操作步骤 ①试剂 ②供应 ③实验室安全 ④显微镜 ⑤用于室间质量保证的玻片储存 ⑥涂片、染色和镜检 ⑦现场复检 ⑧督导小组检查和/或复检印象 ⑨盲法复检痰片抽样 ⑩现场评估概述 * 2、盲法复检 * 盲法复检原则： ①从各个实验室抽取的涂片样品必须是随机选出的，并能代表整个实验室的操作水平。 ②负责抽样的督导员，必须保证复检技术人员不知道初检结果，以确保盲法复检真实性。 ③严格按照随机原则抽取涂片，以保证抽取的样本在统计学上真正代表被评估实验室的整体水平。 ④涂片初检结果与第一复检者盲法复检结果之间的分歧，由第二复检者复检后最终确定。 ⑤督导者应及时将复检结果反馈给被督导实验室，以利于涂片技术与质量的不断提高。 * 盲法复检评价： 盲法复检的目的不是为了验证某个病人诊断正确与否，而是评价整个实验室操作水平。评价的内容除了涂片镜检结果存在的误差之外，还包括检查标本的质量（合格标本和不合格标本的比例）、涂抹的大不和厚度、染色质量如何等，以便采取纠正措施，提高实验室的工作质量。 * 谢谢！ * 结核病痰涂片检查及质量保证 * 一、痰涂片检查 * （一）结核病细菌实验室布局原则 1、结核病细菌学检查要有独立的实验室，不得与其他实验室混用，最好为P3级实验室； 2、培养基制备、洗刷等相对洁净的操作与涂片镜检、培养前处理、药敏试验等污染操作要有独立分开的场所，最好分别在专用的房间进行； * 3、基层只从事涂片镜检的实验室只拥有一间独立房舍的情况下，相对洁净区（镜检区、登记区）与污染区（涂片、染色区）要有明显区分。 * （二）痰标本的收集和运送 干酪痰、血痰或粘液痰为合格标本，量应为3-5毫升。 难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但应注明标本性状，以供分析结果时参考。 收集标本的容器应采用国家参比室推荐的标准痰瓶，或采用直径4厘米、高2厘米的广口塑料（或蜡纸）的或密闭容器。 * 容器上应注明与检验单一致的病人姓名、编号及日期。 需送上一级实验室检查的痰标本应置4℃冰箱保存，外送前认真核对检验单与痰瓶上标注，放专用的冰盒内运送，或用纸袋、塑料袋封扎牢后顺序放入包装盒，盒外注明请勿倒置标志。 * （三）痰涂片操作流程及显微镜检报告方式 直接涂片法操作流程： 1、涂痰膜（大小10×20㎜），自然干燥 2、复红加热初染5分钟 3、流水冲洗 4、盐酸酒精脱色3分钟(必要时重复脱色，但不要过度） 5、流水冲洗 6、美兰复染30秒 7、流水冲洗 8、自然干燥，镜检 * 显微镜检报告方式： 0条/300视野：萋-尼氏抗酸杆菌阴性 1-8条/300视野：实报菌数并重检 3-9条/100视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（+） 1-9条/10视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（2+） 1-9条/1视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（3+） ≥ 10条/1视野：萋-尼氏抗酸杆菌阳性（4+） * （四）细菌学常规检查的注意事项 选择痰标本中脓性、血样、干酪样的部分涂片阳性率较高； 一张玻片只涂一份标本，玻片一次性使用，防止交叉污染； 打开痰盒、涂抹痰膜、烧灼接种环时容易产生气溶胶，应注意正确操作和自身防护； 石炭酸复红初染时必须加温。 * 常见误差原因见下表 * 常见类型 可能原因 建议 假阳性（FP） 1.例如染料沉渣或结晶等被误识为抗酸杆菌 2.原始报告后着色的抗酸杆菌退色 1.对技术人员复训 2.对假阳性涂片重新染色并复检 假阴性（FN） 1.观察涂片的视野数量不够 2.镜检技术能力差 3.染色操作不规范 4.显微镜存在问题 5染液质量差 1.2.3.对技术人员复训 4.现场检查显微镜状态 5.重新购置质量合格的染料并重新配制染液 量化误差（QE） 1.观察涂片的视野数量不够 2.阳性涂片的分级报告标准掌握差 3.镜检技术能力差 4.显微镜存在问题 1.2.3.对技术人员复训 4.现场检查显微镜工作状态 * (六)废弃标本和污染物的处理 废弃标本、痰盒和污染物均须经高压蒸汽灭菌后方能丢弃或清洗； 如需焚烧处理，须置于焚烧炉内彻底焚化。焚化不彻底或暴露焚烧是危险的； 专业处理： 试验操作工作面应以3%石炭酸或其他可靠的消毒液擦拭，再用紫外线灭菌灯照射30分钟。 * 二、痰涂片镜检的实验室质量保证 * 按照世界卫生组织（World Health Organization)和国家结核病防治规划(Nationaltuberculosis programme）的要求，在我国已全面推行DOTS策略或DOTS策略得到良好的贯彻执行的地区，为了持续提高结核病实验室痰涂片检查的工作效率和可靠性，必须建立我国结核病实验室质量保证系统网络。在实验室内部质量控制的基础上，应用实验室间质量检查和评估的方法，进行实验室检查系统的评价，并通过采用一系列措施改进和