凝胶渗透色谱净化-HPLC同时检测麻油中苏丹红Ⅰ-Ⅳ.PDFVIP

凝胶渗透色谱净化-HPLC同时检测 麻油中苏丹红Ⅰ-Ⅳ 北京莱伯泰科仪器有限公司 摘要：采用 LabTech PrepElite GV 全自动凝胶渗透色谱净化-定量浓缩系统对麻油样品进行净化并采用 HPLC 分析其中的苏丹红Ⅰ-Ⅳ，回收率在 93.1%-107.7%之间，RSD 不大于 3.7%，该方法灵敏可靠,适合 于麻油中苏丹红Ⅰ-Ⅳ的同时检测。 前言： 非食用色素是指相对于食品添加剂中的着色剂而言,不能作为食品添加剂在食品中使用的色素,主要是 指一些工业用的化学合成染料。近年来,食品中非食用色素检测已成为食品安全监管的重要内容。 苏丹红( Sudan dyes)是一种人工合成的偶氮类、油溶性的化工染料,被广泛用于溶剂、油、蜡和汽油的 增色以及鞋、地板的增光,共分为苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,都有致癌毒性,其中苏丹红Ⅳ毒性最大,已被国际癌 症研究机构列为三类致癌物之一,禁止作为色素添加剂在食品和饲料中使用,而其残留在动物体内对食用者 的健康和生命安全都存在潜在的威胁。 本文建立了凝胶柱净化- 高效液相色谱法检测麻油中苏丹红色素的方法,此方法较国标方法操作简便， 且取得了理想的结果。 1、 实验部分：  1.1 仪器与试剂 PrepElite GV 全自动凝胶渗透色谱净化-定量浓缩系统（莱伯泰科有限公司，美国波士顿） LC600 二元高压梯度高效液相色谱系统（北京莱伯泰科仪器有限公司，北京） 苏丹红Ⅰ-Ⅳ（中国标准物质中心） 乙腈（色谱纯，Fischer 公司） 乙酸乙酯（AR. 北京试剂厂） 环己烷（AR. 北京试剂厂） 1.2 标样和样品处理 1.2.1 标准溶液配制 苏丹红标准储贮备液：分别精密称取 10 mg 苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ溶于少量乙腈,移入 250 ml 容量瓶 中加乙腈至刻度,混匀,每升含苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各 40 mg ； HPLC 苏丹红标准溶液：吸取标准储备液 0.1、 0.2 、0.4、 0.8 、 1.6 ml ，用乙腈定容至 25 ml 容量 瓶, 此标准系列的浓度为 0.32、0.64、1.28、2.56 mg/L； 凝胶净化苏丹红标准溶液：吸取标准储备液 0.4 ml，用乙酸乙酯：环己烷（1:1）定容至25 ml 容量瓶, 此标准系列的浓度为苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ0.64mg/L； 1.2.2 样品配置 准确称取麻油样品 5.0g，用乙酸乙酯：环己烷=1:1 定容到 25mL，作为待测样品。 1.2.3 样品净化 PrepElite GV 全自动凝胶渗透色谱净化-定量浓缩系统；凝胶渗透色谱过程采用 LabTech SX-3 凝胶净 化住（25mm X 300mm ），色谱流出物采用 PrepElite GV 中的定量浓缩进行自动的在线定量自动浓缩并自 动进行溶剂置换。 在 PrepElite GV 控制软件上编制辣椒酱中苏丹红净化方法，输液泵流速 5ml/min，满环进样（2ml ）， 检测器检测波长 254nm，进样针清洗次数2 次，每次清洗体积 3ml 。 采用时间窗收集模式，凝胶净化苏丹红标准溶液再凝胶净化系统中的流出特征，确定收集时间为 12min-24min。 全自动浓缩系统采用溶剂置换模式，置换溶剂为乙腈。 1.3 检测仪器的检测条件 1.3.1 色谱条件 液相 色谱柱：Labtech C18 （250 mm X 4.5mm，5um ） 柱温：35℃ 流动相：乙酸水(165+1000) ：乙腈= 10: 90 流速：1 mL/min 进样量：20 uL 2、 结果与讨论  2.1 条件优化及结果 2.1.1 凝胶净化条件的确定 凝胶净化系统是根据分子体积的大小将干扰分析的大分子及小分子物质去除，同时收集待分析组分， 从而达到样品净化的目的。所以凝胶净化能达到良好的样品净化的基础是目标分析物和干扰杂质有着不同 的凝胶渗透色谱流出特征。 分别对麻油，苏丹红标准品，在 PrepE