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嗜水气单胞菌分离鉴定与药敏试验-江苏农业科学.PDFVIP

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嗜水气单胞菌分离鉴定与药敏试验-江苏农业科学

江苏农业科学 2017年第45卷第24期 — 165— 王帅兵,熊良伟,朱善元,等.嗜水气单胞菌分离鉴定与药敏试验[J].江苏农业科学,2017,45(24):165-168. doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2017.24.043 嗜水气单胞菌分离鉴定与药敏试验 1 1 1,2 3 3 1 1 王帅兵 ,熊良伟 ,朱善元 ,徐建生 ,吴海波 ,王 婧 ,张 龙 (1.江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300;2.江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州225300; 3.扬州大学兽医学院,江苏扬州225009)   摘要:从江苏、上海不同发病水生动物中分离细菌,经细菌形态特征、生化反应、毒力因子检测及回归感染试验鉴 定,结果与标准菌株一致,获得4株致病性嗜水气单胞菌。药敏试验表明,标准菌株及4个分离菌株对阿米卡星、左氧 氟沙星和氟苯尼考均表现出高度敏感性,对氨苄西林、阿莫西林、红霉素和四环素耐药,对阿奇霉素、链霉素、庆大霉 素、多西环素、诺氟沙星、环丙沙星、复方新诺明的敏感性表现不尽相同,对链霉素、庆大霉素总体表现敏感,对阿奇霉 素、多西环素、诺氟沙星、环丙沙星、复方新诺明存在一定的耐药性。   关键词:嗜水气单胞菌;不同来源;致病性;药敏试验   中图分类号:S182  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2017)24-0165-03   嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)是广泛存在于水体 28℃培养24h,分 腺、肾脏等),分别接种于普通琼脂培养基, 中的一种正常共栖菌,有致病菌和非致病菌之分。致病性嗜 别挑取可疑菌落,涂片进行革兰氏染色镜检。 水气单胞菌是水生动物细菌性疾病的主要病原之一,可引起 挑取革兰氏镜检为阴性短杆菌的疑似菌落在普通琼脂培 [1] 鱼、蛙、鳖等水生动物出血性败血症 。近年来,该病在我国 养基上多次划线纯化,直至得到形态一致、特征稳定的菌落。 各地广泛流行,大规模暴发,死亡率高,给水产养殖业造成巨 选取单个菌落转接到琼脂斜面28℃培养18h,置4℃冰箱保 大经济损失。使用抗菌药是目前防治水生动物细菌性疾病的 存、编号备用。 主要手段。然而,大量研究证明,嗜水气单胞菌已对多种药物 1.4 革兰氏染色及生理生化特性试验 产生耐药性[2-3],给水生动物疾病防治带来困难。 分离菌株及标准株分别连续单传3代纯培养后挑取单个 本试验从江苏、上海等不同地区疑似嗜水气单胞菌病的 菌落,进行革兰氏染色镜检,穿刺接种AHM培养基及接种微 水生动物采集病料,进行细菌分离,以嗜水气单胞菌标准株为 量生化管,按常规方法进行AHM鉴别培养、氧化酶试验及吲 参照,经鉴定获得4个不同来源的嗜水气单胞菌,进行药敏试 哚、甲基红、鸟氨酸脱羧酶、葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、七叶苷、 验并作比较分析,为有效防治嗜水气单胞菌病、监控嗜水气单 水杨苷等生化鉴定。 胞菌的耐药性提供参考。 1.5 菌株的致病性鉴别 1.5.1 溶血试验和溶蛋白试验 取纯培后的单个菌落分别 1 材料与方法 划线接种于5%无菌兔血平板和1%脱脂奶蔗糖胰蛋白胨平 1.1 试剂 板,置28℃培养24h后观察溶血情况和溶蛋白情况。兔血 细菌生化反应微量、营养琼脂培养基、肉汤培养基、AHM 平板上若在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环,认定为α 鉴别培养基、5%兔血平板、1%脱脂奶蔗糖胰蛋白胨、药敏纸

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