多黏菌素B刺激下伤寒沙门菌mig14基因的表达特性-江苏大学.PDFVIP

第２７卷第３期 江 苏 大 学 学 报（医学 版） Ｖｏｌ．２７ Ｎｏ．３ 　 ２０１７年５月 　 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃｉｎｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｙ２０１７ 　 　 　 　 　 　 多黏菌素Ｂ刺激下伤寒沙门菌ｍｉｇ１４基因的表达特性 陈龙，杨璐璐，李敏，殷灵莉，徐顺高，黄新祥，生秀梅 （江苏大学医学院，江苏 镇江２１２０１３） ［摘要］　目的：研究多黏菌素Ｂ（ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ，ＰＢ）刺激下，伤寒沙门菌ｍｉｇ１４基因的表达是否受调节因子Ｆｉｓ、Ｏｍ ｐＲ、ＩＨＦ、ＨｉｌＤ激活。方法：用自杀质粒法分别制备 ｈｉｌＤ及 ＩＨＦ的 亚基编码基因（ｈｉｍＡ）和 亚基编码基因 α β （ｈｉｍＤ）的缺陷株；然后通过实时定量ＰＣＲ和ｌａｃＺ融合实验比较ＰＢ刺激下ｍｉｇ１４在伤寒沙门菌各缺陷株（ｈｉｍＡ、 ｈｉｍＤ、ｈｉｌＤ、ｆｉｓ、ｏｍｐＲ）与野生株中的转录水平差异，筛选出作用于ｍｉｇ１４的调控因子。结果：成功制备伤寒沙门菌 ｈｉｍＡ、ｈｉｍＤ及ｈｉｌＤ缺陷株；在多黏菌素Ｂ刺激下，实时定量ＰＣＲ结果显示ｆｉｓ、ｏｍｐＲ、ｈｉｍＡ、ｈｉｍＤ及ｈｉｌＤ缺陷株中 ｍｉｇ１４ｍＲＮＡ水平明显低于野生株；ｌａｃＺ融合实验中，ｆｉｓ、ｏｍｐＲ、ｈｉｍＡ、ｈｉｍＤ及ｈｉｌＤ缺陷株ＭｉｌｌｅｒＵｎｉｔｓ值明显低于 野生株。结论：在多黏菌素Ｂ刺激下，调节因子Ｆｉｓ、ＯｍｐＲ、ＩＨＦ、ＨｉｌＤ可激活伤寒沙门菌ｍｉｇ１４表达。 ［关键词］　伤寒沙门菌；多黏菌素Ｂ；ｍｉｇ１４；基因调控 ［中图分类号］　Ｒ３７８．２２　　［文献标志码］　Ａ　　［文章编号］　１６７１－７７８３（２０１７）０３－０２４３－０５ ＤＯＩ：１０．１３３１２／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１７７８３．ｙ１７００５５ ［引用格式］陈龙，杨璐璐，李敏，等．多黏菌素Ｂ刺激下伤寒沙门菌ｍｉｇ１４基因的表达特性［Ｊ］．江苏大学学报（医 学版），２０１７，２７（３）： ２４３－２４７． Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｍｉｇ１４ｉｎＳａｌｍｏｎｅｌｌａｅｎｔｅｒｉｃａ ｓｅｒｏｖａｒＴｙｐｈｉｕｎｄｅｒｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢｅｘｐｏｓｕｒｅ ＣＨＥＮＬｏｎｇ，ＹＡＮＧＬｕｌｕ，ＬＩＭｉｎ，ＹＩＮＬｉｎｇｌｉ，ＸＵＳｈｕｎｇａｏ，ＨＵＡＮＧＸｉｎｘｉａｎｇ，ＳＨＥＮＧＸｉｕｍｅｉ （ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＪｉａｎｇｓｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＺｈｅｎｊｉａｎｇＪｉａｎｇｓｕ２１２０１３，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｗｈｅｔｈｅｒｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｇ１４ｉｎＳａｌｍｏｎｅｌｌａｅｎｔｅｒｉｃａｓｅｒｏｖａｒ Ｔｙｐｈｉ（Ｓ．Ｔｙｐｈｉ）ｄｅｐｅｎｄｓｏｎＦｉｓ，ＯｍｐＲ，ＩＨＦａｎｄＨｉｌＤｉｎｔｈｅｂａｃｔｅｒｉａｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢ（ＰＢ）． Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｓｕｉｃｉｄｅｐｌａｓｍｉｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｋｎｏｃｋｏｕｔｈｉｌＤ，ｈｉｍＡ， ｈｉｍＤｏｆＳ．Ｔｙｐｈｉ．ｑＲＴＰＣＲａｎｄｌａｃＺｆｕｓｉｏｎａｓｓａｙｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｉｔｉｏｎａｌｌｅｖｅｌｏｆｍｉｇ１４ ｉｎｔｈｅｍｕｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓ（ｈｉｍＡ，ｈｉｍＤ，ｈｉｌＤ，ｆｉｓａｎｄｏｍｐＲ）ｗｉｔｈ