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第二讲 微生物的培养与应用
重难点拨 稀释涂布平板法 平板划线法 比较项目 操作复杂,需要涂布多个平板 不能对微生物计数 缺点 既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 优点 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 适用于好氧菌 适用范围 从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体 菌体获取 稀释度要足够高,为确保实验成功可以增加稀释度的范围 每次划线前后均需灼烧接种环 注意事项 ①一系列的梯度稀释 ②涂布平板法操作 接种环在固体平板培养基表面连续划线 关键操作 解析 返回 重难点拨 不能区分死菌与活菌 缺点 用计数板计数 方法 利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 原理 设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数 操作 每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数 计算公式 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌 原理 返回 第 二 讲 微生物的培养与应用 NO.1 双基落实 —— 系统化·问题化 NO.3 NO.2 考点突破 —— 题点化·重点化 演练提能 —— 真题集训验能力 NO.3 演练提能 —— 课下检测查缺漏 双基落实 ——系统化·问题化 NO.1 基 础 知 识 系 统 化 基 本 技 能 问 题 化 100 mL 0.5 g 0.5 g 4.0 g 0.4 g 含量 H2O CaCl2 FeSO4 KH2PO4 (NH4)2SO4 成分 ⑤ ④ ③ ② ① 编号 考点突破 ——题点化·重点化 NO.2 考点一 培养基及微生物的纯化培养技术 解析 返回 解析 返回 重难点拨 伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌(菌落呈黑色) 鉴别培养基 培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物 石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的 不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物 以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌 培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌 培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 选择培养基 实例 类型 解析 返回 重难点拨 应用范围 常用方法 结果 条件 培养基及容器 高压蒸汽 灭菌法 玻璃器皿、 金属用具 干热灭菌法 接种工具 灼烧灭菌法 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 强烈的理化因素 灭菌 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源 化学药剂 消毒法 不耐高温的液体 巴氏消毒法 日常用品 煮沸消毒法 仅杀死物体表面或内部的部分微生物 较为温和的物理或化学方法 消毒 1 苯酚浓度(mg/L) 6 5 4 3 2 1 管号
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