第十二章 骨代谢异常的生物化学诊断-临床检验学专业PPT课件精选.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 尿羟脯氨酸是体内胶原代谢的终产物之一，可来自骨胶原以及骨以外的各种胶原组织及饮食中胶原。 易受各种疾病或其他因素包括饮食的干扰。 　 因此，对骨更新或骨吸收不特异，不是骨更新或骨吸收的常规标志物。 2、尿羟脯氨酸 * 返回节 3、Ⅰ型胶原交联降解产物 骨的有机基质中胶原交联90%为Ⅰ型胶原。 骨吸收期间Ⅰ型胶原被水解，其交联分解产物释放入血 并从尿中排除。检测尿脱氧吡啶酚和(或)吡啶酚，或测定交 联区的C-和N-端肽，可作为反映骨吸收的指标。 * 脱氧吡啶酚和吡啶酚是Ⅰ型胶原分子之间构成胶原 纤维的交联物，起稳定胶原链的作用。 是两种天然的不能被还原的交联： ①脱氧吡啶酚：由两个羟赖氨酸侧链和一个赖氨酸侧链反应生成。 ②吡啶酚：由三个羟赖氨酸侧链反应生成的。 骨是两种吡啶酚的主要来源，故这两种吡啶酚测定可用于评价骨吸收。 (1)脱氧吡啶酚和吡啶酚 * 脱氧吡啶酚、吡啶酚是反映骨胶原降解和骨吸收的最特异和灵敏的生化指标之一，脱氧吡啶酚表现出更高的骨吸收特异性和灵敏度，其原因是： ①它是由胶原自然形成的，非生物合成。 ②从尿中排除前不被代谢。 ③骨是其主要来源。 ④仅来源于天然基质的降解产物，不受饮食影响。 测定：高效液相色谱（HPLC）和免疫法 * 是Ⅰ型胶原末端通过吡啶酚类结构连接起来的肽链部分。 是一种骨吸收的指标，与吡啶酚和脱氧吡啶酚一样具有较好特异性，不受饮食等干扰。 返回节 (2) Ⅰ型胶原交联N末端肽和C末端肽 测定：免疫法 * 吡啶酚和交联区端肽水平的评价 已用于骨质疏松、Paget病、其他代谢性骨病、原发性甲状旁腺功能亢进和甲状腺功能亢进、以及其他伴有骨吸收增加的疾病的诊断或评价。 * 吡啶酚和脱氧吡啶酚测定 HPLC法：用HPLC-荧光检测法测定。 免疫法：用等分子交叉反应法检测吡啶酚。 竞争性单克隆抗体ELISA法测定脱氧吡啶酚。 C-端肽和N-端肽测定 ELISA法 抗酒石酸酸性磷酸酶测定 免疫法 尿羟脯氨酸测定 离子交换色谱反相HPLC法。 * 三、有关骨矿物生物化学检测 血清钙检测 血清磷检测 血清镁检测 * 1、血清钙测定 包括游离钙和总钙的测定 （1）血清总钙测定： IFCC推荐：决定性方法为放射性核素稀释质谱法 参考方法为原子吸收分光光度法 我国推荐：常规方法为邻甲酚酞络合酮法 原理：邻甲酚酞络合酮与钙在碱性环境下 生成紫红色 鳌合物，在570-580nm 波长测吸光度值。 * （2）血清游离钙测定： 参考方法为离子选择性电极法（ISE）。 目前应用最多，此方法简便、快速、重复性好，正确和敏感性高。 * 2、血清磷测定 决定性方法为放射性核素稀释质谱法 WHO推荐的常规方法为比色法 我国推荐的常规方法为还原钼蓝法（硫酸亚铁或米吐尔为还原剂） 目前常用方法为紫外分光光度法 * 3、血清镁测定 （1）血清总镁测定： 决定性方法为放射性核素稀释质谱法 参考方法为原子吸收分光光度法 我国推荐常规方法为甲基麝香草酚蓝比色法、钙镁试剂法 钙镁试剂是一种金属色原指示剂，在碱性溶液中与镁结合形成紫色复合物检测。 甲基麝香草酚蓝法：MTB与镁形成兰色复合物。 加入钙螯合剂EGTA可减少钙的干扰，减少蛋白质及血脂的干扰。 * （2）血清游离镁测定： 主要方法为离子选择性电极法（ISE）和酶法 * 四、骨代谢调节激素测定 甲状旁腺素检测 维生素D检测 降钙素检测 * 1、甲状旁腺素测定 可测定C端、中段和完整分子。 国外：免疫放射量度分析（IRMA）法、ICLA法测完整分子 国内：RIA法 ELISA法是新近发展起来的方法，具有快速、灵敏、无同位素污染的优点, 该法最小检测量为2pg／ml，批内及批间CV分别为2.7％～2.9％和7.9％～8.6％。回收率为93％～94％。 * 2、维生素D测定 1,25-二羟维生素D3是反映维生素D状况的最佳指标，以 放射受体法（RRA）、RIA法最为普遍。 3、降钙素测