但很难长满整个培养孔(如图1).pdf

第 14 卷第 2 期 :35 生 　物 　技 　术 Vol14 ,No2 :35 　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　 2004 年 4 月 BIOTECHNOLOGY Apr2004 ( ) 良好,但很难长满整个培养孔 如图 1 ,可能是小鼠的乳腺组 细胞及时转移 ,又可以使未消化下来的细胞得到充分消化。 织少 ,在消化过程中又损失了一部分 ,所以存活得少。 结果发现 ,第一次消化下来的细胞数量很少 ,且大部分为成纤 4 在组织块消化过程中 ,在 PBS 中加葡萄糖 ,用它稀释胶 维细胞 ;第三次消化下来的细胞有点消化过度 ,也不易成活。 原酶 ,然后消化细胞 ,可以有效地抑制成纤维细胞。机制不十 只有第二阶段消化的细胞不但数量多 ,且易成活。 分清楚。可能是在消化过程中葡萄糖不断给乳腺上皮细胞补 6 在乳腺细胞的培养基中 ,考虑到孕兔的血清中含许多 充能量 ,使免于饥饿状态 ,导致成活率增高 ,所以占优势所致。 激素和促生长因子 ,可能更有利于细胞生长 , 因此用孕兔血清 5 实验采用了分阶段消化 ,这样既可以使已消化下来的 代替胎牛血清进行培养。结果发现 ,采用孕兔血清和胎牛血 ( ) 参考文献 : 清培养的乳腺细胞其生长情况没有太大差别 如图 2 、3 。 β 7 参照一些文献 ,在细胞培养过程中也对培养基添加了一 [1 ]Masami Yoshimura and Takami OkaTransfection of - casein chimeric gene 些其它成分 ,如转铁蛋白、催乳素和皮质醇。事实证明没有明 and hormonal induction of its expression in primary murine mammary epithelial ( ) cells[J ] Biochemistry ,1990 ,87 ( 10) :3670 - 3674. 显作用 图4 。 8 在长成的上皮细胞表面总有很多的脂肪滴 ,可能是分离 [2 ]Wilmut I ,A E Schnieke ,J Mcwhir , et al . Viable offspring deriver from fetal ( ) and adult mammalian cell[J ] Nature ,1997 ,385 6619 :810 - 813. 得不太彻底造成。 β