第16章新方法新技术2013.ppt

色谱柱颗粒化学 在杂化的碳-硅基质内具有桥式乙烷的1.7μm颗粒 三官能团键合C18配体 改善了高pH稳定性 改善了硅胶的柱效和反压 改善了低pH稳定性 色谱柱硬件 筛板、柱管和连接件，可在超过140MPa压力下装填，保证色谱柱高柱效和长寿命。 超高效液相色谱的高速检测器 UPLC光导检测器流通池示意图 采样速度快 能减少谱带扩展以保持柱效 灵敏度比HPLC提高2-3倍 流通池体积小、池壁全折射而不损失光能量 超高效液相色谱的应用 药物分析 如天然产物中复杂组分的分析 生化分析 如蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品 食品分析 如食品中农药残留的检测 环境分析 如水中微囊藻毒素的检测 其他 如化妆品中违禁品的检测 Ultra Performance LC? － 代谢物分析 HPLC UPLC? 超高效液相色谱的展望 UPLC可以更快的速度和更高的质量完成以往HPLC的工作，为用户节省宝贵的时间和日常溶剂消耗，从而获得最大的投资回报。 UPLC的高分离度可从容面对复杂组份（如蛋白质与代谢组学等生化领域、天然产物）分离的挑战。 UPLC的高灵敏度可检测更加痕量的目标化合物。 UPLC的快速分析大量样品，实现高通量。 手性(chirality)这个词来源于希腊字“手”(cheir)。 手是手性的 — 右手与左手成镜像。 手性是三维物体的基本属性。如果一个物体不能与其镜像重合，该物体就称为手性物体。 手 性 手性药物液相色谱分离法 有机分子手征性的发现 1848年，法国化学家巴斯顿 （L.Pasteur, 1822～1895）发现酒石酸两种不同的存在形式： 左旋酒石酸 右旋酒石酸 图：巴斯顿把酒石酸晶体分开成两个镜像异构体 一、手性药物的现状 ChP 手性药物是指由具有药理活性的手性化合物组成的药物 反应停: 五十年恩怨 (R)-thalidomide (S)-thalidomide 手性与人类健康: “反应停”悲剧 沙利度胺的S-异构体可导致严重的致畸性 1957年～1962年，造成数万名婴儿严重畸形。 进一步研究表明，其致畸作用是由沙利度胺其中的一个异构体（S-异构体）引起的，而R-构型即使大剂量使用，也不会引起致畸作用。 图：沙利度胺的另一个对映体可 导致 严重的致畸性。 二、手性药物对映体的药效学差异 一对对映体中的两个化合物都有等同的或近乎等同的定性和定量的药理活性； 只有一种对映体具有所要求的药理活性，而另一种对映体则没有显著的药理作用； 各种对映体具有定量上不同的活性; 两种对映体具有定量上等同，但定性上不同的活性。 新世纪的第一个诺贝尔化学奖 手性催化氢化反应和手性催化氧化反应 二、手性药物对映体的药动学差异 1.吸收 2.蛋白结合 3.代谢 手性药物的研究开发过程中，单个对映体的药效、毒性、不良反应的评价及药动学的研究 对映体药物的血药浓度与临床疗效关系的研究 对映体药物的质量标准的制定和质量控制 必须建立分离测定对映体药物的方法 手性药物HPLC拆分机理 “三点手性识别模式” 提供一种手性源，使待拆分的对映异构体（样品）、手性作用物（如固定相）和手性源之间形成一个非对映异构分子的络合物。 手性对映体的分离必须满足的条件是作用物二者间至少有三个作用力（点）存在，并且其中的一个是选择性的（立体的）,立体点之间的作用可以是氢键、偶极-偶极作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用，作用方向可以是吸引也可以是排斥。 C A ′ ′ B C A C A B 对映体 立体选择点 ′ ′ B A 氨基、羧基、R 三点（平面） 手性药物的HPLC分析 柱前手性衍生化法CDR 手性流动相法CMP 手性固定相CSP 1. CDR：手性衍生化试剂法 （间接法） 对映体与手性试剂反应导入第二个手性中心使其成为非对映体，无镜像关系，物理性质也有差异，故可用常规色谱法分离测定。 C E C D A B B A D E （d-） （l-） 普通固定相 手性固定相 d l l d 一个不对称中心 药物分析学(第21章) 药品质量控制中的现代分析方法的进展 (New Analytical MethodTech in the QC of Pharmacy) 主讲 韩海 教学要求 熟悉手性分离色谱法、高效毛细管电泳分析法、超高效液相色谱法的原理与其在药物分析中的应用范围。 了解其他新技术在药物分析中的应用 药物分析 药物 分析测定手段 药物分析方法 药物质量规律 检验 控制 利用 发展 研究 科学 药物分析方法技术的发展 神农尝百草：外观；色味等感官反应和治疗效果分析； 19世纪：天然产物的分离鉴定与应用。形成现代化学制药工程； 2