第八章吸光光度法［ppt课件］.ppt

Mo5+与5SCN-生成红色配合物，与3SCN-和6SCN-生成浅红色配合物，吸光度降低。 8.4.2 影响显色反应的因素 1 溶液酸度（pH值及缓冲溶液） 影响显色剂的平衡浓度及颜色，改变Δl 影响待测离子的存在状态，防止沉淀 影响络合物组成 形式 pH λmax(nm) 形式 pH λmax(nm) H4L+ 1.2 462-465 Sn4+ 1.0 530 H3L 4.8-5.2 462,490 Ga3+ 5.0 550 H2L- 8.4-9.0 512 HL2- 11.4-12.0 532-538 pH对苯芴酮及其络合物的颜色影响 2 显色剂的用量 稍过量，处于平台区 3 显色反应时间 针对不同显色反应确定显示时间 显色反应快且稳定；显色反应快但不稳定； 显色反应慢，稳定需时间；显色反应慢但不稳定 4 显色反应温度 加热可加快反应速度，导致显色剂或产物分解 5 溶剂 6 干扰离子 有机溶剂，提高灵敏度、显色反应速率 消除办法： 提高酸度，加入隐蔽剂，改变价态 选择合适参比 褪色空白(铬天菁S测Al，氟化铵褪色，消除锆、镍、钴干扰) 选择适当波长 8.5 吸光光度分析设计 选择检测波长 选择合适的浓度 选择参比溶液 建立标准曲线 测量条件选择 8.5.1 吸光度测量的条件选择 1 测量波长的选择: 但如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 吸光度测定条件的选择 曲线A为钴络合物的吸收曲线 曲线B为显色剂的吸收曲线 注：采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和界面反射等因素对透光率的干扰 选A=0.2~0.8 2 吸光度读数范围的选择： 3 参比溶液(空白溶液)的选择： 参比溶液的选择一般遵循以下原则： 溶液 代号 在测定波长处有无吸收 试液 1 无 无 干扰有 干扰有 显色剂 2 无 有 无 有 其它所加试剂 3 无 有 无 有（或无） 参比溶液 2+3或（水) 2+3 1 (1+掩蔽)后+2+3 8.5.2 标准曲线制作 理论基础：朗伯-比尔定律 相同条件下 测定不同浓度标准溶液的吸光度A A～c 作图 8.6 吸光光度法的误差 非单色光引起的偏移 物理化学因素：非均匀介质及化学反应 吸光度测量的误差 对朗伯-比尔定律的偏移 8.6.1 非单色光引起的偏移 复合光由l1和l2组成，对于浓度不同的溶液a和b,引起的吸光度的偏差不一样，浓度大，复合光引起的误差大，故在高浓度时线性关系向下弯曲。 非均匀介质 胶体，悬浮、乳浊等对光产生散射，使实测吸光度增加，导致线性关系上弯 8.6.2 物理化学因素 离解、缔合、异构等 如：Cr2O72-+H2O-=2HCrO4-=2H++2CrO42- 化学反应 8.6.3 吸光度测量的误差 若不再此范围：1、改变比色池厚度 2、改变待测液浓度 示差吸光光度法 目的：提高光度分析的准确度和精密度 解决高(低)浓度组分(i.e. A在0.2~0.8以外)问题 分类：高吸光度差示法、低吸光度差示法、 精密差示吸光度法 特点： 以标准溶液作空白 原理： A相对 = ?A = ?bcx- ?bc0= ?b? c 准确度：读数标尺扩展, 相对误差减少, c0愈接近cx, 准确度提高愈显著 8.7 常用的吸光光度法 示差分光光度法（示差法）原理 示差法需要较大的入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。 设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cscx)。则： Ax= ?bcx As= ?bcs ΔＡ＝Ａx －Ａs = ?b(cx－cs）= ?bΔc 示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx： cx =cx测 + Δc 示差法标尺扩展原理： T/% Tr/% 普通法：cs的T=10%；cx的T=5%示差法：cs做参 比,调T=100%则 cx的T=50% ； 标尺扩展10倍 例：在 某 光 度 法 测 定 中， 以 有 色 物 质 的 纯 溶 剂 做 参 比 测