药物分析第十一章抗生素类药物的分析课件.ppt

第十一章 抗生素类药物的分析;一、概述;3.来源： 生物合成（发酵） 化学合成或半合成 4.抗生素的特点： 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差;5.抗生素质量分析 采用生物学法与物理化学法 鉴别：理化方法、微生物法 检查：水分、pH值、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合,灵敏度高；但操作复杂费时 理化方法：准确度与专属性较高, 且操作简便；但与临床疗效有偏差;二、 β–内酰胺类;2. 主要理化性质： 1）酸性（羧基）： pKa 2.5-2.8 酸性较强 与碱金属成盐后水溶性好 2） UV（共轭）： 青霉素类：苯环取代基 头孢菌素类：母核有共轭结构;头孢利定的NMR鉴别法(JP14);头孢氨苄鉴别的TLC条件;;;头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查;异构体; 有关物质; 5.含量测定 1）碘量法（ChP2000） 原理：青霉素与头孢菌素本身不与碘反应，但其碱性降解产物可消耗碘;反应分两步进行： 水解反应 (按化学计算量进行) 氧化-还原反应 (无定量关系，受温度、pH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定) ;空白试验 因样品中杂质会消耗碘，故应作空白试验 ;试验条件：（I2氧化） 弱酸性（pH4.5） 碱↑ I2 → IO3- + I- 酸↑ 某些药物与碘生成复盐沉淀;特点 灵敏度高：样品 : 碘 = 1 : 8 反应条件、实验操作要求高 含量;2）电位配位滴定法（汞量法） 原理：青霉素不与汞盐反应，其碱性降解产物可与Hg2+络和 Hg+ + 2R-SH (RS)2Hg + 2H+ ;3）酸碱滴定法 4）硫醇汞盐法 青霉素 青霉烯酸硫醇汞盐 5）羟肟酸比色法 β–内酰胺类 红色 6）HPLC法：应用广泛;阿莫西林克拉维酸钾片;三、氨基糖苷类;2.性质 1）碱性（氨基）：临床应用其硫酸盐 2）溶解度（氨基、羟基）：水溶性 3）旋光性（糖）：多个手性碳 4）稳定性（苷）：强酸、碱条件均可水解 ;3.鉴别 1）茚三酮反应： 具羟基胺类,α-氨基酸性质 链霉素 + 水和茚三酮 蓝紫色 2） N-甲基葡萄糖胺（Elson-Morgan）反应： 链霉素 N-甲基葡萄糖胺 红色 ;3）麦芽酚（Maltol)反应 (链霉糖特有） 链霉素 麦芽酚 紫红色 ;4. 检查 1）链霉素中链霉素B的检查 来源：发酵中产生 BP：薄层色谱法（杂质对照品法）;2）庆大霉素C 组分测定 （系统适用性试验） 色谱柱：ODS 流动相：H2O-HAc-MeOH配制的庚烷磺酸钠溶液(0.2M)，必要时调节甲醇的含量 检测波长：330nm（邻苯二甲醛柱前衍生） 要求：NC2 ≥2000，C2a峰和C2峰的分离度应符合要求，重复进样RSD2.0% 5. 含量 微生物法、HPLC法等;四、四环素类;2.性质 1）两性： -OH：酸性 N(CH3)2：碱性 与酸、碱均可成盐；临床多用盐酸盐 2）旋光性 3）UV和荧光： 4）与金属离子络合： 酚羟基、烯醇基与Ca2+、Mg2+络合显色;5）稳定性 易发生异构化,降解等反应,性质不稳定 ; ;3.鉴别 1）浓硫酸反应 2）FeCl3反应： （酚羟基） 显红色~褐色 3） TLC、HPLC 4）荧光： （ 含共轭双键） 紫外灯照射下产生不同颜色荧光;4. 检查 TLC、HPLC法 杂质吸收度（降解产物颜色较深） 5.含量 ChP、USP： HPLC法 JP： 比色法;五、高分子杂质的检查