药物毒理学讲座2011.ppt

单次给药毒性试验动物要求：两种以上，啮齿类动物(每组5只)，非啮齿类(2只)，要求二级以上动物(即饲养于简易屏障系统，无危害动物种群的微生物和寄生虫,为我国当前的合格的标准实验动物) 。 性别：至少一种，♀♂各半。 途径：临床po、iv，动物只iv。 剂量：设计的剂量组能全面掌握毒性剂量范围，要求能求出近似致死量足够的剂量范围，不一定LD50，非啮齿类要求能观察到出现明显毒性症状的剂量范围，并希望能显示出剂量—反应关系。(近似致死量：因用动物量少，剂距大，求出死亡率只能近似致死量，以xx～xx mg/kg范围表示)。 观察期：14d，死亡和存活动物均应剖检，异常者要做病理组织学检查。 常用LD50计算方法  ● Horn (霍恩)氏法(又叫平均移动法、剂量递增法) ● 寇氏法和改进寇氏法 ● 概率单位法 ● 序贯法(又叫平均数法、阶梯法、上－下法) ● Bliss法(又叫最大似然性法) LD50计算方法之—Horn氏法简介 原理 Horn氏法，又叫平均移动法、剂量递增法，是利用剂量对数与死亡率(反应率)的转换数(即几率单位)呈直线关系而设计的方法。 优缺点 使用动物数少；可直接从Horn氏表查出LD50及其95％可信限，不需计算，甚为简便。但LD50的95％可信区间范围较大，方法精确度尚不够。 Horn氏法设计原则★ 4个剂量组；每组动物数相等；每组4只或5只；设计剂量时可根据化学物致死剂量范围的宽窄应用两个剂量系列，其组距分别为2.15倍和3.16倍。根据每组动物数、组距和每组动物死亡数，即可从Horn氏表中查得LD50及其95％可信限。 见《Microsoft PowerPoint－霍恩法.ppt》 (六) 毒理学安全性评价 我国现有的毒理学安全性评价程序： 《食品安全性毒理学评价程序》 《农药安全性毒理学评价程序》 《新药(农药)毒理学研究指导原则》 《化妆品安全性毒理学评价程序》 《化学品毒性鉴定管理规范》(入世为与国际接轨颁布) 实验室研究质量规范(good laboratory practice,GLP)，对毒性鉴定机构的认证、实验室要求作出明确规定。 对不同化学品(食品添加剂、药物、农药、化妆品、工业化学物等)，由于接触方式、途径、剂量不同，按照不同的国家标准，采用不同行业规范程序进行评价。 毒理学安全性评采用分阶段试验的原则(考虑急性危害、慢性危害、远期危害)。各阶段试验之间有关联，要按顺序进行。 如急性毒性实验是所有毒理学实验的基础； 慢性毒性实验的剂量、观察指标的选择要参考亚慢性毒性实验的结果。 根据前一阶段的实验结果，判断是否进行下一阶段的实验。 不同阶段的毒理学试验项目 我国现有毒理学评价程序多数为4个阶段。《化妆品安全性毒理学评价程序》为5个阶段。 新药研究分为全身用药的毒性试验、局部用药的毒性试验、特殊毒理研究，三部分。 化学物的种类不同，用途不同，试验方法和先后顺序不同(如化妆品、食品，口皮急毒顺序不同)。 第一阶段，包括：? 急性毒性试验；? 局部毒性试验。 目的：主要是测定LD50或LC50，并进行急性毒性分级，为其它试验提供剂量参考依据，并推测靶器官。 农药、化装品要进行? 皮肤、黏膜刺激试验；? 眼刺激试验；? 皮肤致敏试验； ? 皮肤光毒试验；? 光变态反应试验。 第二阶段，一般包括：? 蓄积试验；? 致突变试验。 目的：了解与受试物多次接触后体内的蓄积情况以及可能的危害，并判断是否具有致突变性进而估计致癌性。 蓄积试验，以死亡为指标，有一定局限性，目前有些评价程序已经去掉。 致突变试验，包括多种组合，以观察不同的遗传终点。 某些受试物在第一、第二阶段试验后，可决定是否进行下一阶段的试验。 如引进产品、生产工艺，国外已经登记注册，毒性资料全面，其质量规格、生产工艺、与国外产品一致，进行第一阶段和第二阶段结果与国外一致，可以不进行第三、第四阶段试验。 第三阶段，包括：? 亚慢性毒性试验；? 生殖及发育毒性试验；? 代谢试验。 亚慢性毒性试验目的：确定反复接触受试物所引起的毒性效应