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紫外/可见分光光度计 原理及使用 分光光度法概述 分光光度法基本原理 UV762紫外/可见分光光度计 1.主要部分 2.仪器系统及结构简介 3.主要功能 4.特点及用途 仪器使用 仪器检验和维护 分光光度法概述 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法称为吸光光度法，包括比色法、紫外可见分光光度法和红外光谱法等。紫外可见分光光度法广泛地应用于无机和有机物质的定性和定量测定。 分光光度法主要应用于测定试样中微量组分的含量，它具有灵敏度高、准确度和稳定性较好、适用范围广、所需仪器简单价廉等优点。 分光光度法基本原理 吸收光谱的分类 郎伯-比尔定律 光吸收定律的适用范围 吸收光谱的分类 吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱 原子吸收光谱是由原子外层电子选择性到吸收某些波长的电磁波而引起的 分子吸收光谱比较复杂。在分子能级中，同一电子能级中有几个振动能级，同一振动能级中又有几个转动能级。电子能级间的能量差一般为1-20eV，由电子能级跃迁而产生的吸收光谱位于紫外及可见光部分，这种由价电子跃迁而产生的分子光谱称为电子光谱。 郎伯-比尔定律 实验表明有色溶液对光的吸收程度与该溶液的液层厚度、浓度以及入射光的强度等因素有关。如果保持入射光的强度不变，则光吸收程度（A）与液层厚度及溶液的浓度有关。其定量关系式为： A=lgI0/I=KLC A—被测物在给定波长的需光吸光度值 I0—单色光通过待测溶液前的强度 I—单色光通过待测溶液后的强度 K—吸光系数，为一常数，其数值与溶液的性质及入射光波长有关 L—待测溶液的厚度 C—溶液中待测物质的浓度 这个关系式仅适用于单色光及均匀非散射液体、固体和气体 郎伯-比尔定律是由表示液层厚度和光吸收关系的郎伯定律及表示溶液浓度与光吸收关系的比尔定律合并而得 由郎伯-比尔关系式可以看出，被测物质对单色光的吸光度与被测物质的浓度成正比 实际测试时，单色光通过被测物质达到光电接收器，由光电倍增管或光电池转换成光电流，而光电流的强弱决定了吸光度值A的大小。 T％ =I0/I T％ —透射率，I0—通过参比样品的光电流 I—通过待测样品的光电流 郎伯-比尔定律的贡献就是发现了透射比的负对数值的变化与物质的浓度的变化呈正比关系。 不同物质对不同波长的单色光呈现出不同的吸光值，这一变化特征也就是分光光度法用于物质的定性定量分析的理论基础。 无论是何种分光光度计，其最基本的工作要求就是为了准确获得物质在某一波长的透射比或在某一光谱波长范围的吸光度变化特性。双光束分光光度计，同时测量参比样品和待测样品。由于参比样品和待测样品是同时测量，所以任何由光源带来的影响都被抵消扣除了，从方法上保证了测量精度。 光吸收定律的适用范围 偏离郎伯-比尔定律现象 原因： 1.入射光为非单色光 2.溶液中的化学反应 UV762紫外/可见分光光度计 主要部分 仪器系统及结构简介 主要功能 特点及用途 主要部分 光源、单色器、吸收池、检测器、测量系统 仪器系统及结构简介 主要由三大部件组成：光学系统、电源系统、微机系统。 主要功能 自动控制功能 分析测试及信息处理功能 特点及用途 特点：UV762是一台双束光扫描形紫外/可见分光光度计，具有较宽的光谱范围，操作快速简便。 用途：广泛用于有机、无机、石油、制药、环境、生物化学、医学、食品等国民经济部门，是常规质量控制和质量分析不可缺少的方法之一。 仪器使用 开机仪器自检 光度测量 光谱测量 定量测量 动力学测量 多波长测量 仪器保养和维护 保持环境清洁，防尘防湿 比色池避免溶液溅入，以防腐蚀 仪器开机时必须同时打开钨灯和氘灯，待波长校正后可关闭不使用的灯源，以延长光源灯使用寿命 勿松动光路部分螺钉与螺母，以防光路偏差 不能用手或软硬物体接触仪器镜面，以免造成镜面污染。 仪器外壳不可放置重物，以免造成光路移位 不可在强光下工作 仪器每周至少开机1-2次，每次约半小时 Thank you! * * *