2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体（46张PPT）.ppt

2.2 动物细胞工程 教学目标 了解动物细胞融合的原理、过程和意义。 理解单克隆抗体制备的过程和应用 重点难点 1.教学重点： 单克隆抗体的制备和应用 2.教学难点： 单克隆抗体的制备过程 问题探讨 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。 (三)、动物细胞融合的应用 灭活病毒诱导细胞融合的原理： 7、动物细胞融合技术的意义？ 骨髓瘤细胞 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？ 课后习题 1. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤　　 C.①②③④ 　 D.②③ 3.“生物导弹”是指 （　 ） A.单克隆抗体 　　　　　　　　 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞　　 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 2.为什么不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的融合？ 就目前常用的细胞融合方法来看，不管是用物理的、化学的方法，还是生物的方法，其融合率都不可能是100%。仅用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞。更重要的是，即使两个细胞已发生融合，但并不一定是研究者期望得到的细胞类型。目前动物细胞融合技术最有价值的应用就是单克隆抗体的制备。我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，如果仅取一个脾细胞（含B淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的；若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合，就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 3.如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ 融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。 生产单克隆抗体时，要在培养基中加入特定的试剂筛选出杂交瘤细胞．下列可作为这种试剂的是(　　) A.能选择性地抑制骨髓瘤细胞DNA复制的试剂 B.能激活B淋巴细胞的原癌基因的试剂 C.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质合成的试剂 D.能抑制B淋巴细胞DNA复制的试剂 A 能选择性地抑制骨髓瘤细胞DNA复制的试剂，使得小鼠骨髓瘤细胞及自身融合细胞都不能在培养基上生长，而B淋巴细胞以外培养条件下不能无限制增殖，故在选择培养基上能生长的就是杂交瘤细胞，A正确 单克隆抗体制备过程中，未涉及到的生物学原理是( ) A.高度分化的动物细胞核具有全能性 B.细胞膜具有一定的流动性 C.肿瘤细胞在体外培养时可以无限增殖 D.一个浆细胞只能产生一种抗体 下列关于单克隆抗体的叙述，正确的是(　　) A.培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体的过程体现了动物细胞核的全能性 B.将抗原注入小鼠体内，小鼠发生免疫反应产生的抗体也称为单克隆抗体 C.用灭活的仙台病毒作诱导剂，得到两两融合的细胞均为杂交瘤细胞 D.筛选获得所需的杂交瘤细胞后，可在体内或体外培养，进而获得单克隆抗体 D A 下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是(　　) A.制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养 B.需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞 C.需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞 D.利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞 植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是(　　) A.原生质体融合和动物细胞融合--生物膜的流动性 B.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养--细胞分裂 C.植物组织培养和动物细胞培养--细胞的全能性 D.纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理--酶的专一性 C D 如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是(　　)A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B.利用聚乙二醇、灭活的