[中学联盟]山东省聊城市外国语学校高中生物人教版选修3 1-2 基因工程的基本操作程序 课件.ppt

1．基因工程的基本操作程序 (1) 的获取。 (2) 的构建。 (3)将目的基因导入 。 (4)目的基因的 。 2．目的基因的获取 (1)目的基因主要是指 的基因，也可以是一些具有 的因子。 (2)常见方法 ①从基因文库中获取 基因文库的种类 ②利用PCR技术扩增目的基因 a．原理： 。 b．条件： 、DNA模板、 、四种脱氧核苷酸。 c．过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链， 与单链相应互补序列结合，然后在 作用下进行延伸，如此重复循环多次。 d．结果：每一次循环后，目的基因的量可以 ，即成指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)。 ③人工合成法：如基因比较小， 又已知，可借助 用化学方法直接人工合成。 小结：1.提取目的基因方法的比较 2．PCR技术与DNA复制的比较 3．基因表达载体的构建 (1)基因表达载体的组成 ①启动子 位置：基因的首端。 功能：是 识别和 结合的部位，驱动基因转录出 。 ②终止子 位置：基因的尾端。 功能：使 在所需要的地方停止下来。 ③标记基因：鉴别受体细胞中是否含有 。 (2)基因表达载体的功能 使目的基因在受体细胞中 ，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够 和发挥作用。 (3)基因表达载体的构建 一般用同一种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。 4．将目的基因导入受体细胞 (1)转化的概念 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内 的过程。 (2)将目的基因导入植物细胞 ① 法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。 ② 法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。 ③ 法：我国科学家独创的一种方法。 (3)将目的基因导入动物细胞 方法： 法。 常用受体细胞： 。 (4)将目的基因导入微生物细胞 第一步：首先用Ca2＋处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为 细胞。 第二步：将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收 ，完成转化过程。 将目的基因导入受体细胞的方法比较 目的基因导入受体细胞的结果分析 说明：上图中发生②与发生①相比，②会使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，原因是在进行细胞分裂时，细胞核上的DNA经复制后平均分配到两个子细胞中，保证了亲子代遗传性状的稳定性，而①细胞分裂时，细胞质是不均分的，子细胞不一定含有目的基因。 1．分子检测 (1)检测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。 ①方法： 技术(DNA探针＋转基因生物 )。 ②结果：如果显示出杂交带，就表明目的基因 。 (2)检测目的基因是否转录 ①方法： 技术(DNA探针＋转基因生物 )。 ②结果：如果显示出杂交带，则表明目的基因 。 (3)检测目的基因是否翻译成蛋白质 ①方法： 。 ②结果：若有杂交带出现，则表明目的基因 。 2．个体水