09年江苏地区生物学科选修微生物的实验室培养(苏教版).ppt

专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实 验室培养 一、基础知识 (一)微生物: 1.特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. (二)培养基 1.分类(按物理形态分) (1)液体培养基 (2)固体培养基 2.培养基内所含的基本物质 (1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐 3.培养基内所需的其他条件 (1)pH值 如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性 (2)特殊营养物质---- ? 如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素 (3)氧气的含量 如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件 (三)无菌技术 1、获得纯净培养物的关键: 2、无菌技术包括的四大方面(参看教材15页) 3、消毒与灭菌 (1)消毒： 概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。包括芽孢和孢子吗？ 方法: 煮沸消毒法 巴氏消毒法:如牛奶的消毒 化学药剂消毒:酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等 紫外线消毒 （2）灭菌 概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 方法：a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌 二、实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算－称量－溶化－灭菌－倒平板 （二）纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 （三）将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h后，观察并记录 三、课题延伸：菌种的保藏 1、斜面保藏 （临时保存） 2、甘油保藏 （长期保存） 再 见 讨论: (1).培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ (2).为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ (3).平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ (4).在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 讨论: (1).为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ (2).在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ (3).在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 2.稀释涂布法: (1)系列稀释操作: 涂布平板操作 讨论:涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ (2)碳源 可作为碳源的物质有: 含碳无机物: 、 、 含碳有机物： (3)氮源 可作为氮源的物质有: 含氮无机物： 、 、 、 含氮有机物： 练习1（多项选择） 1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌 2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮源是 A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐 C 蛋白质 D 无机氮化物 3、下列叙述不正确的是 A 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B 液体培养基和固体培养基所含的最基本物质不相同 C 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 思考: 1)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2)消毒和灭菌有何不同？ 3)为什么消毒牛奶要用巴氏消毒法? 4)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 ①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、烧瓶和吸管 ③实验操作者的双手 思考1 溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热? 答: ②加琼脂的目的是什么? 答: 思考2 在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有 培养基的锥形瓶的目的是什么？ 答: ②培养皿能否用高压蒸汽灭菌？ 答: 练习2: 1.获得纯净培养物的关键是 A 将用于微生物培养的器皿.接种用具和培养基等器具进行灭菌 B 接种纯种细菌 C 适宜环境条件下培养 D 防止外来杂菌的入侵 2.下列操作与无菌技术无关的是 A 接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手 B 接种前用火焰烧灼接种针 C 培养在50℃左右时搁置斜面 D 在酒精灯的火焰旁完成 3.外科手术器械和罐头食品的处理,要以能够杀死什么为标准 A 球菌 B 杆菌