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[名校联盟]四川省成都经济技术开发区实验中学高考生物选修1课件:专题2
专题2 微生物的培养与应用;要点探究;一、微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
;2.无菌技术
(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
(2)关键:防止外来杂菌的入侵。
(3)措施;3.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)纯化大肠杆菌
①原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
②方法:平板划线法、稀释涂布平板法。;;;;;;;;【例1】 氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表所示。
;(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的 。?
(2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是 。?
(3)从用途上来说,Ⅱ号培养基属于 培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是 。?
(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为 。?
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(如图2)。从图2可知,SP1菌在 培养条件下最早停止生长,其原因是 ? 。?;思维导引:
1.从营养成分上看,选择培养基有什么特点?
↓
2.Ⅲ号培养液中,氯苯有什么作用?对细菌的增殖有何影响?;
问题引领:(1)分离细菌一般使用何种培养基?
(2)如何对培养液中的细菌进行计数?
1.筛选菌株
(1)原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)刚果红染色的两种方法的比较
;2.统计菌落数目的方法
(1)显微镜直接计数法
①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。
②方法:用计数板计数。
③缺点:不能区分死菌与活菌。
(2)间接计数法(活菌计数法)
①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一???菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作:设置重复组,增强实验的说服力与准确性;为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
③计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。;3.设置对照
(1)判断培养基中是否有杂菌污染,需将未接种的培养基同时进行培养。
(2)判断选择培养基是否具有筛选作用,需设立基础培养基进行接种后培养,观察两种培养基上菌落数目,进行对比得出结论。;(1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在 的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以 为碳源、并加入 的培养基上,筛选周围有 的菌落。?
(2)在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落,对它们分别培养,并完成环节②,且三种等量酶液中酶的浓度相同,则你认为三种酶液的活性 (一定相同、不一定相同、一定不同),可以通过 进行定量测定。?
(3)根据测定结果,①环节常选择木霉,则②中获得的酶是 酶。?
(4)生产中可以满足④环节的常见菌种是 ,为了确保获得产物乙醇,⑤环节要注意 。?;解析:(1)富含纤维素的土壤中,含有大量以纤维素为碳源的纤维素分解菌。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素分解后,复合物无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,通过此方法来筛选纤维素分解菌。(2)酶液中酶的浓度相同,酶的活性不一定相同,可通过分解纤维素后所产生的葡萄糖量是否相等来鉴定其活性是否相同。(3)木霉能产生纤维素酶,可以将纤维素分解。(4)在酒精发酵中常用的微生物是酵母菌,在接种过程中一定要避免杂菌污染。乙醇是酵母菌无氧发酵的产物,发酵过程中一定要保持无氧的环境。
答案:(1)富含纤维素(其他答案合理也可,如落叶较多等) 纤维素 刚果红 透明圈;1.(2011年新课标全国高考)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土
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