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【浙江专用】2014金榜生物教师用书配套课件选修1_第一部分《微生物的利用》(92张PPT)
【解析】(1)若用自然生长的外植体进行组织培养,灭菌、消毒顺序为先用70%的酒精浸泡,再用5%的次氯酸钠溶液浸泡 5 min,然后用另一5%的次氯酸钠溶液浸泡5 min,最后在超净台中用无菌水清洗。 (2)常用LB液体培养基扩大培养细菌,用LB固体培养基分离微生物。 (3)从土壤稀释液中分离微生物时,对照组应为LB全营养培养基。制作培养基时,常用琼脂作为凝固剂。尿素在高温下易分解,不能用加热法灭菌,常用G6玻璃漏斗过滤,以除去杂菌。分离细菌常用的方法有划线分离法和涂布分离法。实验组中只有唯一氮源,并不是所有的微生物都能生存,故菌落数量少于对照组。脲酶分解尿素产生氨,氨是碱性物质,能使酚红变为红色。 答案:(1)D (2)LB液体培养基 (3)LB全营养培养基 琼脂 G6玻璃漏斗 涂布分离法 少于 因为能利用尿素的细菌产生脲酶,将培养基中的尿素分解,产生氨使指示剂(酚红)呈红色 3. (2013·宁波模拟)大肠杆菌是生存在人体肠道中的正常菌群,每克粪便中含有109个,且能够与致病菌混杂生长。如果食品和饮用水中出现大肠杆菌,就意味着食物可能被粪便污染而带上致病菌,因而常将大肠杆菌的数量作为食品卫生的检测指标之一。请据此回答下列问题: 类型二 大肠杆菌的培养和分离? 【典例2】(2013·浙大附中)大肠杆菌是生活在人和高等动物体内的一种常见细菌,在饮用水的检测中常用它作为水源是否受到污染的指示菌,在遗传学上常作为实验材料,在基因工程中常用它作为受体细胞,为人类的健康和科学技术的发展作出了许多贡献。 请回答下列有关大肠杆菌的问题: (1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑 、 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、易培养、 等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)分离大肠杆菌时常用的接种方法是 法和 法。前者操作简单,后者 更易分开,但操作复杂些。 (3)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当的时间,观察 。 (4)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,下列对操作过程说法不妥的是( ) A.严格操作、多次重复 B.保证待测样品稀释的浓度比较合适 C.倒平板培养 D.计数所有菌落,取其平均值 (5)通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小、硬度和颜色等 对细菌进行初步的鉴定(或分类)。 (6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过 处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。 【解析】(1)大肠杆菌的培养除需要合适的营养条件外,还需要适宜的温度、酸碱度(pH)和渗透压。由于大肠杆菌变异类型容易选择、繁殖速度快,常作为遗传学研究的实验材料。 (2)分离微生物常用的接种方法有划线分离法和涂布分离法。前者方法简单;后者单菌落更易分开,但操作复杂些。 (3)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适当的时间,观察培养基上是否有菌落产生。若固体培养基被细菌污染,在适宜条件下培养一段时间,细菌会大量繁殖,形成菌落,可根据菌落数量的多少判断污染程度。 (4)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,应该采用倒平板培养,并且严格操作、多次重复;保证待测样品稀释的浓度比较合适。 (5)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。 (6)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠道出现严重症状,所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。 答案:(1)温度 酸碱度(pH) 生活周期短(或繁殖快) (2)划线分离 涂布分离 单菌落 (3)培养基上是否有菌落产生 (4)D (5)菌落特征 (6)灭菌 【变式训练】要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种,一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题: (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养,一般用LB培养基,在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是 ,为调节渗透压,要加入一定量的 。为进行大肠杆菌的分离,还要加入琼脂配制成固体培养基,并进行倒平板的操作。 (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________,为此,必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用 法灭菌,接种环采用灼烧法灭菌。
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