【生物】2011高三生物一轮复习精品课件：选修3 1.1、1.2 DNA重组技术的基本工具基因工程的基本操作程序.ppt

【解析】　基因工程中目的基因来源于自然界中的含有目的性状的一切生物，可以是动物、植物，也可以是真菌、细菌，还可以是人等；在基因工程中获取目的基因以及将目的基因和载体结合构成基因表达载体必须使用同一种限制酶进行切割，以获得相同的黏性末端，再在DNA连接酶的作用下，将目的基因和载体连接，构成基因表达载体； 人的胰岛素原基因可以在大肠杆菌体内得以表达，但是由于大肠杆菌是原核生物，没有内质网、高尔基体等细胞器的加工，合成的胰岛素原不具有胰岛素的功能，即没有生物活性；作为标记基因，有利于重组基因在细胞内表达的鉴定筛选，但对于目的基因的表达没有促进等调控作用。 【答案】　D 2．(2007年高考北京卷)利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是(　　) A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白 【解析】　该题考查了目的基因的检测和目的基因的表达两个概念之间的区别。基因表达的产物是蛋白质，因此，只有在受体细胞中检测或提取到了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达，A、C只能说明完成了目的基因的导入，B只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过程。 【答案】　D 3．(2009年上海高考题)人体细胞内含有抑制癌症发生的P53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。 (1)目的基因的获取方法通常包括___和____。 (2)上图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部分区域。与正常人正比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为_____。 (3)已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成　　　　个片段；而患者的则被切割成长度为____对碱基和____对碱基的两种片段。 (4)如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是____(以P+表示正常基因，P-表示异常基因)。 【解析】　(1)目的基因既可以从供体细胞中直接提取，也可人工合成。(2)基因内部个别碱基对的替换为基因突变。(3)据图分析可知，正常人会被切成三个片段。(4)由正常人被限制酶E切出来的具体片段可知，该人的基因型是P+P-。 【答案】　(1)从细胞中分离　通过化学方法人工合成 (2)见下图 基因碱基对的替换(基因突变) (3)3　460　220 (4)P+P- 4．(2008年山东高考题)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 (1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的____处，DNA连接酶作用于___处。(填“a或“b”) (2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_____法。 (3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_____技术，该技术的核心是_____和_____。 (4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_____作探针进行分子杂交检测，又要用_____方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。 【解析】　限制性内切酶的切点选择很严格，只会切断某段特定DNA序列中的某个特定位点——磷酸二酯键，而DNA连接酶可以将该键连接起来。重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法除了农杆菌转化法外，还有基因枪法和花粉管通道法。 导入外源基因的细胞需要利用植物组织培养技术将其培养为植株，过程为：取材、去分化(或脱分化)形成愈伤组织、再分化形成试管苗、移栽培育成完整植物体。转基因是否成功，可测定是否有转基因产物产生，也可通过改变条件观察植物性状的变化来加以确定。 【答案】　(1)a　a (2)基因枪(花粉管通道) (3)植物组织培养　脱分化(去分化)　再分化 (4)耐盐基因(目的基因)　一定浓度盐水浇灌的(移栽到盐碱地中) 5．(2008年江苏高考)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。 图1　转基因操作流程图 图2　引物对与模板结合示意图 表1　引物对序列表 引物对A P1　AACTGAAATGTAGCTATC P2　TTAAGTCCATTACTCTAG 引物对B S1　GTCCGACTAGTGGCTGTG S2　AGCTGGCGTTTAGCCTCG 表2　几种限制酶识别序列及切割位点表 限制酶 AluⅠ EcoRⅠ PstⅠ SmaⅠ