专题5 课题1　DNA的粗提取与鉴定.ppt

金品质?高追求 我们让你更放心 ！ ◆生物?选修1(生物技术实践)?(配人教版)◆ 金品质?高追求 我们让你更放心！ 返回 ◆生物?选修1(生物技术实践)?(配人教版)◆ 课题1　DNA的粗提取与鉴定 DNA和蛋白质技术 DNA的提取是现代生物技术进行 中药鉴别的最关键步骤。总DNA的有 效提取要求材料中的DNA尽可能少的 降解。但用于生药真实性鉴别的药材 在干燥、加工、贮藏等过程中均造成 了DNA不同程度的降解，一般DNA的 含量也比较低。药材中次生代谢产物含量较高，会干扰提取。另外也可能有微生物引起的外源DNA的污染。DNA的质量将直接关系到实验的成败。不同的研究目的对DNA的纯度和量的要求不尽相同。本课题将为你提供从生物体内直接提取DNA的机会。 知识清单 DNA的粗提取和鉴定 1．DNA的粗提取 (1)基本思路：利用DNA与______、________和______等在物理和化学性质方面的______，提取DNA，去除其他成分。 (2)方法和原理 ①DNA和________等其他成分在不同浓度的______溶液中溶解度不同，利用这一特点选择适当的________就能使DNA充分溶解，而使______沉淀，或者相反，以达到分离目的。 1．(1)RNA　蛋白质　脂质　差异　 (2)①蛋白质　NaCl　盐浓度　杂质 ②DNA不溶于______，但是某些______则可溶于其中。 ③______能水解蛋白质，但是对______没有影响。 ④大多数蛋白质不能忍受________的高温而发生变性，而DNA在________以上才会变性。 ⑤________能瓦解细胞膜，但对DNA无影响。 2．DNA的鉴定 在沸水浴的条件下，DNA遇________会被染成蓝色。 ②酒精　蛋白质　③蛋白酶　DNA　④60～80 ℃　80℃　⑤洗涤剂 2．二苯胺 尝试应用 1．DNA在下列浓度的NaCl溶液中，溶解度最低的是(　　) A．2 mol·L－1　　　 　B．0.015 mol·L－1 C．0.14 mol·L－1 D．5 mol·L－1 解析：DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度最高，在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低，并且DNA在冷却的酒精溶液中会析出白色丝状物。 答案：C  D 2．鉴定DNA的试剂及出现的颜色反应是(　　) A．斐林试剂、砖红色 B．苏丹Ⅲ染液、橘黄色 C．双缩脲试剂、紫色 D．二苯胺试剂、蓝色 知识清单 实验设计 1．选取实验材料：选用________的生物组织，成功的可能性更大。 2．破碎细胞，获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的________，同时____________，过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞，需要先用________溶解________。 3．去除滤液中杂质 (1)方案一：通过控制________的浓度去除______。 1．DNA含量较高 2．蒸馏水　用玻璃棒搅拌　洗涤剂　细胞膜 3．(1)NaCl溶液　杂质　 (2)方案二：直接向滤液中加入____________，反应10～15 min，________中的________能够分解蛋白质。 (3)方案三：将滤液放在________的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围，使________沉淀析出而________分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。 4．DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于冷却的________这一原理，可从______中析出较纯净的DNA，此时DNA的状态为__________。 (2)嫩肉粉　嫩肉粉　木瓜蛋白酶　 (3)60～75 ℃　蛋白质　DNA 4．95%酒精　滤液　白色丝状物 5．DNA的析出与鉴定 (1)DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液体积相等的、______的______溶液。 (2)DNA鉴定：鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为________的NaCl溶液5 mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物，各加入二苯胺________。 在沸水浴的条件下，DNA遇__________会被染成蓝色，因此__________可以作为鉴定DNA的试剂。 5．(1)冷却　酒精　(2)2 mol/L　4 mL　二苯