专题5 课题3　血红蛋白的提取和分离.ppt

水平测试 1．用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是(　　) A．相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质 B．相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质 C．相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质 D．二者根本无法比较 金品质?高追求 我们让你更放心 ！ ◆生物?选修1(生物技术实践)?(配人教版)◆ 金品质?高追求 我们让你更放心！ 返回 ◆生物?选修1(生物技术实践)?(配人教版)◆ 课题3　血红蛋白的提取和分离 DNA和蛋白质技术 蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成，人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。对蛋白质的研究与应用，首先需要获得纯度较高的蛋白质。因此，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是生物科学研究中经常要做的工作。 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和CO2的运输。在本课题中，我们将以血红蛋白为实验材料，学习蛋白质提取和分离的一些基本技术。 蛋白质电泳示意图 知识清单 凝胶色谱法 1．概念：凝胶色谱法也称作__________，是根据______________分离蛋白质的有效方法。 2．原理：大多数凝胶是由__________构成的小球体，内部有许多贯穿的通道，当不同的蛋白质通过凝胶时，______________的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程______，移动速度______；而______________的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在________移动，路程______，移动速度______，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离开。 1．分配色谱法　相对分子质量的大小 2．多糖类化合物　相对分子质量较小　较长　较慢　相对分子质量较大　凝胶外部　较短　较快 尝试应用 1．下列各项中，一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是(　　) A．层析柱高　　　　 　B．层析柱的直径 C．缓冲溶液 D．样品的分布 解析：分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关。样品的分布也影响分离度，缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷，因此也影响分离度。只有层析柱的直径一般不会影响分离度。 答案：B 2．凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是(　　) A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径 B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度 C．将酶或细胞固定在凝胶中 D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度 解析：凝胶的种类较多，但每一种凝胶内部都有孔隙。相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 答案：A 知识清单 缓冲溶液和电泳 1．作用：在一定范围内，缓冲溶液能抵制________对溶液______的影响，维持pH基本不变。生物体内进行的各种生物化学反应都是在__________进行的，为了能够在________下准确模拟______的过程，就必须保持体外的______与体内的基本一致。 2．配制：通常由______种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的________就可以制得____________的缓冲液。 1．外界的酸碱　pH　一定的pH下　实验室条件　生物体内　pH 2．1～2　使用比例　在不同pH范围内使用 尝试应用 人体血液中的缓冲物质都是由一种弱酸和相应的强碱盐组成，下列正确的一项是(　　) A．Na2CO3/NaHCO3 B．Na2HPO4/Na3PO4 C．NaH2PO4/Na3PO4 D．H2CO3/NaHCO3 D 知识清单 电泳 1．概念：带电粒子在______的作用下发生______的过程。 2．原理：许多重要的生物大分子，如______、______等都具有________的基团，在一定pH下，这些基团会带上______或______。在电场的作用下，这些带电子分子会向着_________移动。电泳利用了待分离样品中各种分子________以及分子本身的______、______的不同，使带电分子产生不同的_____从而实现样品中各种分子的分离。 1．电场　迁移