中学联盟广东省肇庆市实验中学高中生物（理）选修3课件：2.1.2植物细胞工程的实际应用 (共29张PPT).ppt

植物组织培养 植物体细胞杂交 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.制备单克隆抗体 4.细胞核移植技术 回顾： 动物细胞工程常用的技术手段： 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 动物细胞工程的基础 就是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 1、动物细胞培养概念： 2、原理：细胞增殖 定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 胰蛋白酶处理 取出组织 胚胎或幼龄动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 转入培养瓶内培养 （贴壁生长长成单层细胞。 有接触抑制现象）。 ①原代培养 3、过程 原代培养 增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养 去掉组织间 蛋白 加培养液 强调一：细胞贴壁过程 ■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 ■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于帖附。 ■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二：接触抑制 细胞的接触抑制 定义： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程） ②传代培养 原代细胞 10—50代细胞(细胞株) 无限传代（细胞系） 分瓶传代培养 胰蛋白酶 原代培养 接触抑制 传代培养 传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。 继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。 传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化 接触抑制 动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质已改变 4、动物细胞培养条件 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？ 无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、血清血浆、微量元素等） 温度和PH 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 气体环境 O2和CO2（95%空气和5%CO2） 离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力。 保证细胞顺利的生长增殖 5.动物细胞培养技术的应用: 1.蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.应用于基因工程 主要用于作为受体细胞 3.检测有毒物质，判断某种物质的毒性 4.细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药物 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 --------------------（　 ）　 A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞 2、动物细胞工程技术的基础是 ------（ 　）　 A.动物细胞融合 B.单克隆抗体　 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 A D 课堂反馈练习 3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （　 ）　A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性　C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强 D 4、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ） A．限制性内切酶 B．DNA连接酶 C．胰蛋白酶 D．果胶酶 C 5．(2009年浙江理综)用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是(　　) A．都需用CO2培养箱 B．都需用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性 答案：C 6.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。 A 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体或组织 培养结果 获得细胞 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 既然动物体细胞核仍具有全能性，为什么不能直接利用动物体细胞培育动物体？ 利用动物体细胞核移植技术 动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。 怎样才能使动