中学联盟湖南省长沙市湘一芙蓉中学高中生物人教版选修1专题2课题1 微生物的实验室培养.ppt

黄曲霉 青霉 生殖 直立菌丝 营养菌丝 孢子生殖 类群 结构特点 遗传物质 繁殖方式 举例 病毒 原核 生物界 真菌界 原生 生物界 无细胞结构 (核酸衣壳囊膜) 原核(细胞壁、膜、质) 真核(细胞壁、膜、质、核) 真核(细胞膜、质、核) 噬菌体 烟草花叶病毒 流感病毒 细菌(形状菌) 放线菌 霉菌、蘑菇、酵母菌 衣藻、草履虫、变形虫 DNA或RNA DNA DNA DNA 增殖：吸附→注入→合成→装配→释放 分裂生殖 (二分裂) 孢子生殖 出芽生殖 分裂生殖 有性生殖 一、基础知识： （一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。 1.培养基的类型和用途 液体培养基：增菌、工业生产 固体培养基：在固体培养基中加入凝固剂（琼脂）制成。 用于纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种 微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落 液体培养基： 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 半固体培养基： 无动力 有动力(弥散) （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 按功能不同 选择培养基： 根据某种微生物的特殊营养要求或其对化学、物理因素的抗性而设计的培养基。 鉴别培养基： 培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的其他菌落相区分的培养基叫～。 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。 天然培养基有血清、血浆和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染; 合成培养基：根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求． 水 作用： ①优良的溶剂 ②可维持生物大分子结构的稳定，并参与某些重要的生物化学反应 （二）微生物的营养 ：提供碳元素的物质。 ①无机碳源：CO2、NaHCO3、CaCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②有些碳源是异养微生物的主要能源物质 ⑴.概念 ⑵.来源： ⑶.作用： 碳源 氮源 ①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。 ②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等 主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物。 ⑵.来源： ⑶.作用： 提供氮元素的物质。 ⑴.概念： 无机盐 无机化合物 ⑵.来源： ⑶. 提供除碳源、氮源以外的各种重要元素。 ⑴.概念： ⑶.常见的生长因子： ⑴.概念： ⑵.作用： 微生物生长不可缺少的微量有机物。 酶和核酸的组成成分。 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。 生长因子（特殊营养物质） ⑷.来源： 酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等。 （三）无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 成功地培养微生物的关键。 （１）消毒定义： 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义： 利用较为温和的化学或物理方法，杀死物体表面或内部大部份微生物的过程 以强烈的理化因素消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程 3.常用的消毒与灭菌的方法 煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 紫外线消毒 …… 灭菌方法 要求 适用范围 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 160－170℃ 1－2h 100kPa 121℃ 15-30min 接种环的灭菌 培养皿、玻璃棒的灭菌 培养基、无菌水的灭菌 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭