人教新课标（标准实验版）选修1《生物技术实践》专题3 课题1 菊花的组织培养 （共29张PPT）.ppt

三 实验操作 注意： 最好放在无菌箱中培养 培养期间定期消 温度控制在18-22℃，并且每天用日光灯光照12h 4 培养 三 实验操作 5 移栽 注意： 先打开封口膜，让组培苗适应一段时间 需将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间之后再移栽到土壤里 在整个组培过程中，如何实现无菌环境的？ 1、培养基及相关器具的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精擦拭、酒精灯灼烧） 4、无菌箱中的培养 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间 四 植物组织培养的应用 1 试管苗的快速繁殖 2 无病毒植物的培育 3 人工种子 4 转基因植物的培育 5 提取产物 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 植物的组织培养 1958年，美国科学家斯图尔德在特定条件下，成功将胡萝卜的韧皮细胞培育成了一株完整的植物。 一 植物组织培养的基本过程 韧皮部细胞 细胞团块 长出根茎叶 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 产生根芽 用于离体培养的植物组织或器官 这也是愈伤组织 指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。 愈伤组织 组培过程中的愈伤组织 愈伤组织的特点： 细胞排列疏松无规则 高度液泡化 形态无定形 由薄壁细胞组成 愈伤组织 组培失败的例子 生长状况不好的愈伤组织 被细菌感染的愈伤组织 根发育不好 探究 影响植物组织培养的因素 外植体 Q1：外植体的选择需要考虑哪些因素，选择什么样的外植体进行组培更容易成功？ 二 探究影响植物组织培养的因素 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 产生根芽 Q1：外植体的选择需要考虑哪些因素？选择什么样的外植体进行组培容易成功？ 需要考虑植物材料的年龄，所以一般选择植物的幼嫩部分（生命力旺盛，分裂分化能力强；含有的病毒少），比如茎尖、根尖、幼嫩的叶片等； 需要考虑保存时间的长短，保存时间越短，材料生命力越旺盛；保存时间越长，越容易受到污染。 Q2：可不可以直接用微生物培养基进行培养？为什么？ 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 产生根芽 脱分化 二 探究影响植物组织培养的因素 植物生长需要大量的无机营养，但微生物的培养基含有的无机营养很少，所以不适合用微生物培养基进行培养。 Q2：可不可以直接用微生物培养基进行培养？为什么？ MS培养基中为什么要添加有机物？ 如果外植体含有叶绿体（如茎尖、叶片），虽然有一定的自养能力，但是很弱；如果外植体不含叶绿体（如根尖），则没有自养能力。因此需要添加有机物。 添加蔗糖的作用是什么？ 提供碳源、能量 调节渗透压 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 产生根芽 再分化 二 探究影响植物组织培养的因素 1937年，美国科学家怀特培养的细胞开始分裂，堆积成一团菜花状瘤状物，即愈伤组织，但不能继续分化为根、茎、叶等器官。后来研究发现，只有在培养基中加入适当比例的细胞分裂素和生长素，愈伤组织才能分化出芽和根。 资料 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 产生根芽 再分化 二 探究影响植物组织培养的因素 Q3：生长素和细胞分裂素的使用对于植物组织培养有什么影响？ Q3：生长素和细胞分裂素的使用对于植物组织培养有什么影响？ 组培过程中关键激素是生长素和细胞分裂素。 两种激素的不同使用顺序出现不同结果； 两种激素的不同用量出现不同结果： 生长素/细胞分裂素比值高 → 有利根形成； 生长素/细胞分裂素比值低 → 有利芽形成； 生长素/细胞分裂素比值适中→有利愈伤组织形成。 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 产生根芽 二 探究影响植物组织培养的因素 Q4：先诱导根还是先诱导芽？为什么？ 产生根芽 Q4：先诱导根还是先诱导芽？为什么？ 先诱导形成芽； 因为芽形成后可进行光合作用提供养料，从而进一步保证存活率。 Q5：整个操作过程中，需要考虑哪些因素？ 温度、光照、PH适宜，保证无菌环境。 二 探究影响植物组织培养的因素 外植体 脱分化 愈伤组织 再分化 产生根芽 -未完待续- 三 实验操作 1 制备MS培养基 （1）配制各种母液： 大量元素浓缩10倍 → 配制1 L培养基加母液100 mL 微量元素浓缩100倍 → 配制1 L培养基加母液10 mL 有机物浓缩100倍 → 配制1 L培养基加母液10 mL 三 实验操作 MS培养基大量元素母液制备 序号 药品名称 培养基浓度（mg/L） 扩大10倍称量(mg/L) 1 NH4NO3 1650 16500 2 KNO3 1900 19000 3 CaCl2·2H2O 440 4400 4 MgSO4·7H2O 370 3700 5 KH2PO4 170 1700