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计数室通常也有两种规格 16×25型: 即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格 25×16型: 即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。 不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。 2、计数 16×25型: 一般取四角的四个中方格(100个小方格)计数 25×16型: 一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。 3、计算 以1mm×1mm×0.1mm型为例 计数室容积为0.1mm3,则每个小方格的容积为1/4000 mm3 。 100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数 酵母细胞个数/1mL = 80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数 例1 通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有?? ?? 个。 2×108 例2 检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1 mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个/mL。 5n×105 4、血球计数板的使用方法步骤 ③ 计数: 稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。 ① 镜检计数室: 在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数。 ② 加样品: 将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去。 使酵母菌混合均匀,减少误差 1.从试管中吸出培养液进行计数前,建议你将试管轻轻震荡几次。这是为什么? 详解:从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几下,这样使酵母菌分布均匀,防止酵母凝聚沉淀,提高计数的代表性和准确性,求得的培养液中的酵母菌数量误差小。 5、血球计数板的使用注意事项 探究实验设计时要遵循的原则: 科学性原则、可行性原则、对照原则、 单一变量原则和平行重复原则。 2.本探究需要设置对照吗?如果需要,请讨论说明怎样设计;如不需要,请说明理由。 第 1 天 第 4 天 第 6 天 第 7天 不需要。因为该实验在时间上形成前后的自身对照 稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数 3.需要做重复实验吗? 需要。尽量减少误差。对每个样品计数三次,取其平均值。 4.如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应当采取什么措施? 详解:如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。具体方法是:摇匀试管,取1mL酵母菌培养液,加入成倍的无菌水稀释,稀释n倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4~5个酵母细胞为宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。 对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。 5.对于压在小方格接线上的酵母菌,应当怎样计数? 6.计数时应不时调节焦距,才能观察到不同深度的菌体。 7.血球计数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,以免损坏网格。 3.注意事项 (1)显微计数时,对于压在小方格边线上的酵母菌,应只计固定的相邻两个边及其顶角的酵母菌。 (2)从试管中吸出培养液进行计数前,需将试管轻轻振荡几次,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,减小误差。 (3)结果记录最好用记录表,如下: (4)每天计数酵母菌数量的时间要固定。 (5)培养和记录过程要尊重事实,不能主观臆造。 【典例4】某小组进行“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验时,同样实验条件下分别在4个试管中进行培养(如表),均获得了“S”型增长曲线。根据预测的实验结果从理论上分析,下列说法错误的是( ) A.4个试管内的种群在K/2时增长最快 B.4个试管内的种群达到K值的时间Ⅳ=Ⅰ>Ⅱ=Ⅲ C.试管Ⅲ内种群的K值与试管Ⅱ不同 D.试管Ⅳ内的种群数量先于试管Ⅱ开始下降 【
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