人教版生物选修三1.2 基因工程的基本操作程序 教学课件 （共46张PPT）.ppt

1．将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点： 易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力。 ②原理：Ti质粒上的T-DNA可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上。 仔细阅读课本将目的基因导入植物细胞 （1）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是？ （2）农杆菌如何感染植物细胞？ （3）农杆菌的Ti质粒中Ｔ－ＤＮＡ有何特点？ （4）若用农杆菌转化法应选用什么作为运载体？将目的基因插入运载体的什么部位？此时的农杆菌是受体细胞吗？ （5）获得含有目的基因的受体细胞后如何获得具有新性状的植物体？原理？ （6）农杆菌转化法和基因枪法分别适用于什么生物？ ③过程： ④优点：稳定、经济、有效 将外源目的基因插入Ti质粒的T-DNA中形成重组Ti质粒 将重组Ti质粒转入农杆菌 使含重组Ti质粒的农杆菌感染植物细胞 含目的基因的植物细胞 表现出新性状的植株 （2）基因枪法 （3）花粉管通道法 2．将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 　受精卵 　新性状动物 3．将目的基因导入微生物细胞 　　　阅读课本：早期基因工程为何选择原核生物作为受体细胞？方法？ ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 1．获取目的基因的常用方法、PCR技术的原理、条件、过程、方式、结果。 2．人工合成目的基因的方法及过程。 3．构建基因表达载体的目的、基因表达载体的组成及各组成部分的作用。 4．基因表达载体的构建过程？将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法分别是什么？ 5．农杆菌转化法的原理（即Ti质粒的T-DNA的作用特点）、适用范围。 6．叙述用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程。 复习（15分钟后黑板展示） 阅读课本：目的基因的检测与鉴定 目的基因检测的过程分为哪几步？分别用什么方法？ 鉴定（个体生物学水平）方法？ 四、目的基因的检测与鉴定 检测— （分子检测） 鉴定—— （个体生物学水平） ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ——检查是否成功 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插 入了目的基因 ①检测转基因生物染色体的DNA上是否插了目的基因 过程: A．首先取出转基因生物的基因组DNA。 B．对含目的基因的DNA片段作放射性同位素标记，以此做探针。 C．使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带，表明染色体已插入染色体DNA中。 方法: DNA分子杂交 DNA分子杂交示意图 　　采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 目的基因的检测示意图 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法: 分 子 杂 交 方法: 抗原－抗体杂交 过程: 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交，若出现杂 交带，表明目的基因转录出了mRNA. 鉴定—— 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 　　例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 思考：若培育耐盐碱的水稻，如何鉴定？ 归纳： 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： 学以致用 　　　若用Bt毒蛋白基因作为目的基因培育转基因抗虫棉，可用什么方法？叙述培育过程！ 练习１：为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （１）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”） a a （２）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （３）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术，该