人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养（共22张PPT）.ppt

三. 实验操作---大肠杆菌的纯化培养 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算－称量－溶化－灭菌－倒平板 （二）纯化大肠杆菌 最常用的接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 * * 专题2 :微生物的培养与应用 培养基的营养物质和无菌技术的应用 培养基的营养物质和无菌技术的应用 了解有关培养基和无菌技术的基础知识 1.何为培养基？ 3.不同的培养基有不同的配方，但是其基本成分都相同，都包括哪些营养元素？有何作用？请举例说明。 阅读教材P14～15相关内容，回答以下问题： 2.按照不同的培养基划分标准，培养基有哪些种类、配制特点及其应用？ （一）培养基 一、基础知识： （一）培养基 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 （1）按物理状态来分： （2）按功能来分: （3）按成分来分: 1.培养基的类型和用途 固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。 可分为选择培养基和鉴别培养基. 可分为天然培养基和合成培养基。 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材P83附录内容) 3. 培养基成分： 一般都含有 、 、和 、 等营养物质，另外还需要满足微生物生长对 、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及 、 、渗透压等的要求。 水 碳源 氮源 无机盐 PH 氧气 CO2 C 分离导入了目的基因的受体细胞 加入青霉素等抗生素 分离固氮菌 不加氮源的无氮培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入青霉素 分离杂交瘤细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷 分离自养型微生物 不加含碳有机物的无碳培养基 分离金黄色葡萄球菌 加入高浓度食盐 应用 培养基 1．关于微生物营养物质的叙述中，正确的是 A、是碳源的物质不可能同时是氮源 B、凡碳源都提供能量 C、除水以外的无机物只提供无机盐 D、无机氮源也能提供能量 D 100ml H2O ⑦ 0.5g CaCl2 ⑥ 0.5g FeSO4 ⑤ 9.25g MgSO4 ④ 4.0g K2HPO4 ③ 0.4g （NH4）2SO4 ② 10g 粉状硫 ① 含量 成分 编号 2．右表是某微生物培养基成分，请据此回答： （1）右表培养基可培养的微生物类型是 。 （2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。如不想浪费此培养基，可再加入 。 （3）若除去成分②，加（CH2O），该培养基可用于培养 。 自养型微生物 含碳有机物 固氮微生物 （4）表中营养成分共 有 类。 （5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行是 。 （6）右表中各成分重量确定的原则是 。 （7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是________________。 3 调整pH 依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂） 100ml H2O ⑦ 0.5g CaCl2 ⑥ 0.5g FeSO4 ⑤ 9.25g MgSO4 ④ 4.0g K2HPO4 ③ 0.4g （NH4）2SO4 ② 10g 粉状硫 ① 含量 成分 编号 1.何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？ 2.什么是消毒？灭菌？两者有何区别？ 3.常用的消毒与灭菌的方法有哪些？有何要求？ 4.请说出干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法的操作步骤。 （二）无菌技术 涂布器 接种环 接种针 ① 煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min (1)消毒的方法 2.常用的消毒与灭菌的方法 （二）无菌技术 1. 概念 又称无菌操作，泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 ② 巴氏消毒法：70～75 ℃下煮30min或 80℃ 下煮15min ③ 化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;用氯气消毒水源等 ④ 紫外线消毒 接种室、接种箱或超净工作台 ①灼烧灭菌 (2)灭菌的方法 ②干热灭菌：160～170 ℃下加热1～2h。 ③高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15～30min. 接种工具，接种环、接种针或其他金属用具 玻璃器皿（吸管、培养皿） （冷却至50℃） 倒平板 讨论1，2 讨论3，4 平板划线法 讨论2，3 菌种的保存 1、临时保藏法： 对象： 温度： 缺点： 2、甘油管藏法： 对象： 温度： 频繁使用的菌种 4℃（冰箱） 容易被污染或 产生变异 长期保