人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养(共41张PPT).ppt

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人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养(共41张PPT)

(2)在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 答:以免接种环温度太高,杀死菌种。 (3)在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 答:线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 3个划线平板 1个不划线平板 (重复实验) (空白对照) (3)培养 放入37℃恒温箱中培养12h~24h 2.稀释涂布平板法 ①菌液的梯度稀释: ②涂布平板操作: (1)概念与原理: 聚集的微生物 单个细胞 菌液梯度稀释 菌落 涂布平板 (2)操作: 生长繁殖 ①系列梯度稀释操作 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 注意:移液管需要经过灭菌;试管口和移液管离火焰1~2cm处。 * 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 课题背景 微生物研究和应用的前提: 如何获得纯净培养物? 防止杂菌入侵,获得纯净的培养物 ①合适的营养和环境条件 ②确保其他微生物无法混入 一 基础知识 1.概念: 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.类型: 按物理性质划分: 按化学成分划分: 按用途划分: (一)培养基 固体培养基 液体培养基 有 无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 (1)按物理性质划分: 单个 或少数菌体 2.特征: 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。 3.意义: 1.定义: 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 ※菌落 天然培养基 合成培养基 化学成分不恒定的天然有机物 如:牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基 化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 如:高氏1号培养基、查氏培养基。用于分类和鉴定 (2)按化学成分划分: 基础培养基 鉴别培养基 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质 将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来 用于鉴别不同类型微生物的培养基 选择培养基 (3)按用途划分: ※几种选择培养基 ①加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 ②不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 ③不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物 3.基本成分: 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源: 有机碳源: CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源: 有机氮源: NH4+、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注:含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 4. 配制原则 (1)目的明确: (2)营养全面、浓度适宜、比例恰当 (3)适宜的pH值: 有机碳源 异养型: 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型: 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱,真菌偏酸 (CO2碳源) 生产 科研 微生物生长不可缺少的微量有机物 如:维生素、氨基酸、碱基等 (4)特殊营养: ※蛋白胨:动物蛋白初步消化的产物,富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。主要提供氮源和维生素。 ※牛肉膏:新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而成,含有多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。提供碳源、氮源、能源、磷酸盐和维生素。 (二)无菌技术 防止外来杂菌的污染 1.哪里需要无菌? 2.如何控制无菌? 无菌的意义: (1)实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。 (2)培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 1.无菌的范围 (1)消毒 (2)灭菌 概念 较为温和理化方法 杀死部分有害微生物 (不包括芽孢和孢子) 强烈的理化因素 杀死所有的微生物 包括芽孢和孢子 常用方法 ①煮沸消毒法 ②巴氏消毒法 ③化学药剂消毒法 ④紫外线消毒法 ①灼烧消毒法 ②干热灭菌 ③高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿,培养基等 2.无菌的方法 ※芽孢:在某些细菌生长的一定阶段,细胞内形成一个圆形、椭圆形或柱形的,抗逆性强的休眠体。 ※孢子:真菌所产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞,能直接发育成新个体。 接种室内空气、接种箱、超净工作台 用紫外线照射30min 紫外线消毒 实验者的手臂、实验台等 酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液 化学药剂

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