人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养（共41张PPT）.ppt

（2）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 （3）在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 3个划线平板 1个不划线平板 （重复实验） （空白对照） （3）培养 放入37℃恒温箱中培养12h～24h 2.稀释涂布平板法 ①菌液的梯度稀释： ②涂布平板操作： (1)概念与原理： 聚集的微生物 单个细胞 菌液梯度稀释 菌落 涂布平板 (2)操作： 生长繁殖 ①系列梯度稀释操作 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 注意：移液管需要经过灭菌；试管口和移液管离火焰1～2cm处。 * 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 课题背景 微生物研究和应用的前提： 如何获得纯净培养物？ 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 ①合适的营养和环境条件 ②确保其他微生物无法混入 一 基础知识 1.概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.类型： 按物理性质划分： 按化学成分划分： 按用途划分： （一）培养基 固体培养基 液体培养基 有 无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 （1）按物理性质划分： 单个 或少数菌体 2.特征： 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。 3.意义： 1.定义： 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 ※菌落 天然培养基 合成培养基 化学成分不恒定的天然有机物 如：牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基 化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 如：高氏1号培养基、查氏培养基。用于分类和鉴定 （2）按化学成分划分： 基础培养基 鉴别培养基 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质 将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来 用于鉴别不同类型微生物的培养基 选择培养基 （3）按用途划分： ※几种选择培养基 ①加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 ②不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 ③不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物 3.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 4. 配制原则 (1)目的明确： (2)营养全面、浓度适宜、比例恰当 (3)适宜的pH值： 有机碳源 异养型： 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型： 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸 （CO2碳源） 生产 科研 微生物生长不可缺少的微量有机物 如：维生素、氨基酸、碱基等 (4)特殊营养： ※蛋白胨:动物蛋白初步消化的产物，富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类。主要提供氮源和维生素。 ※牛肉膏：新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而成，含有多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。提供碳源、氮源、能源、磷酸盐和维生素。 （二）无菌技术 防止外来杂菌的污染 1.哪里需要无菌？ 2.如何控制无菌？ 无菌的意义： （1）实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 （2）培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 （3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 （4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 1.无菌的范围 （1）消毒 （2）灭菌 概念 较为温和理化方法 杀死部分有害微生物 (不包括芽孢和孢子) 强烈的理化因素 杀死所有的微生物 包括芽孢和孢子 常用方法 ①煮沸消毒法 ②巴氏消毒法 ③化学药剂消毒法 ④紫外线消毒法 ①灼烧消毒法 ②干热灭菌 ③高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿，培养基等 2.无菌的方法 ※芽孢：在某些细菌生长的一定阶段，细胞内形成一个圆形、椭圆形或柱形的，抗逆性强的休眠体。 ※孢子：真菌所产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞，能直接发育成新个体。 接种室内空气、接种箱、超净工作台 用紫外线照射30min 紫外线消毒 实验者的手臂、实验台等 酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液 化学药剂