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人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养(共35张PPT)
三.大肠杆菌的纯化培养: 制备培养基 纯化大肠杆菌 * 到目前为止, 几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖 都与微生物学有关 课题1 微生物的实验室培养 1.提供营养和环境条件 2.防止杂菌污染 微生物的类群 原生生物: 原核生物: 真菌: 病毒: 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 一.培养基: 1、概念: 2.种类(物理性质): 固体培养基 液体培养基 有无 凝固剂琼脂 微生物生存的营养物质和环境条件 微生物在固体培养基表面生长,可形成肉眼可见的菌落 3.基本成分: 碳源、氮源、水、无机盐 对 pH、特殊营养物质和氧气的需求 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 分析营养构成? 不同的培养基,配方不同,但都有基本成分 不同微生物需要采用 不同的培养基配方 空间 衣着和手 器皿 灭菌 酒精 灯火焰附近 灭菌 二.无菌技术: 防止外来杂菌的污染 较为温和理化方法, 杀死部分有害菌体 (不包括芽孢、孢子) 强烈的理化方法, 杀死所有微生物 (包括芽孢、孢子) 1.消毒与灭菌: 消毒 灭菌 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌 细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 方法 条件 作用对象 消 毒 煮沸 消毒法 100 ℃,煮沸5~6 min 杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢 巴氏 消毒法 70~75 ℃,煮30 min 或80 ℃,煮15 min 不耐高温的液体 化学药 剂消毒法 70%的酒精 对双手消毒 石炭酸 煤酚皂 对空气消毒 一定浓度的乳酸、食醋 通过熏蒸对空气进行消毒 紫外线法 紫外线照射30 min 物体表面或空气中的微生物 灭 菌 灼烧 灭菌 在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 对接种环、接种针或其 他金属工具灭菌,也可 以对试管口、瓶口灭菌 干热 灭菌 在干热灭菌箱内, 160~170 ℃条件 下,加热1~2 h 耐高温且需保持干 燥的物品,如玻璃 器皿和金属用具等 高压蒸 汽灭菌 在高压蒸汽灭菌锅 内,121 ℃,100 kPa, 灭菌15~30 min 培养基 紫外线 灭菌 照射30 min 小型接种室、接种箱等 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 第4课时 学习·探究区 固体 液体 碳源、氮源、水、无机盐 C C 分散成单个细胞, 形成单个菌落 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g ㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算: 培养基用量 依配方计算各成分的用量 2.称量: 3.溶化: 牛肉膏黏稠,用称量纸称取 牛肉膏、蛋白胨易吸潮,要快、加盖 牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解 →取纸 →蛋白胨、NaCl →琼脂 →补水定容 4.调pH、分装、封口: 5.灭菌: 6.倒平板: 培养基、培养皿 倒平板 约50℃ 防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染 灼烧灭菌, 防止瓶口的微生物污染培养基 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度? 答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 答:空气中的微生物可能在
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