人教版选修1专题3课题2月季的花药培养（共30张PPT）.ppt

* 花粉 胚状体 愈伤组织 从芽 生根 移栽 脱分化 分化 再分化 诱导 产生花粉植株的两条途径 花粉 从芽 （三）影响花药培养的因素 （三）影响花药培养的因素 1. 材料的选择 ?不同植物 （三）影响花药培养的因素 1. 材料的选择 ?不同植物 ?同一植物的不同生理状况 （花期早期－初花期） （三）影响花药培养的因素 1. 材料的选择 ?不同植物 ?同一植物的不同生理状况 （花期早期－初花期） ?合适的花粉发育期 （单核居中期与靠边期之间） （三）影响花药培养的因素 1. 材料的选择 材料的选择： 　　花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般，月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 　　选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。 　　为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。 ?不同植物 ?同一植物的不同生理状况 （花期早期－初花期） ?合适的花粉发育期 （单核居中期与靠边期之间） ?此外，植株生长条件、材料低温预处理、 接种密度等 （三）影响花药培养的因素 1. 材料的选择 2. 培养基的组成 月季花药培养基配方 在1000mL MS培养基配方中添加 2.4—D 0.4mgKT 0.2mgIAA 4mg 调节PH至5.8。 请播放AVSEQ10.dat 实验操作 结果分析与评价 （一）材料的选取 　　　　　染色镜检 （二）材料的消毒 　　　　　酒精、氯化汞、次氯酸钙 （三）接种和培养 （一）材料的选取 　　选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 　　最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 （二）材料的消毒 1. 花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒 2. 无菌水清洗 3. 无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4. 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中 2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯 酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5. 无菌水冲洗3~5次 用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。 　　为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 　　为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 　　答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 （三）接种和培养 　　灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 MS培养基配方中添加GA、IBA和BA，质量浓度分别为0.1mg/L、 0.5mg/L和1mg/L。 诱导丛芽或胚状体的培养基配方 MS培养基各成分用量减半，添加IAA，质量浓度为1mg/L。 诱导生根的培养基配方 　　通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 　　一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。 *