人教版选修3专题2课题2第二课时动物细胞融合与单克隆抗体（共29张PPT）.ppt

“太空婚礼” 2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命： 植物细胞“新人”——黄花烟草和革新一号烟草 叶肉细胞原生质体； 动物细胞“新人”——小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞。 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术？ 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) (6) 回顾：植物体细胞杂交流程图 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 正在融合的原生质体 杂种细胞再生出细胞壁 愈伤组织 再生出小植株 杂种植株AB (5) 动物细胞融合过程 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 动物细胞融合（概念） 思考题 1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？ 酶解法，如纤维素酶或果胶酶 2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？ 无需，因为动物细胞无细胞壁 3.动物细胞融合诱导常用的方法有哪些？ 聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激 5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能 4.融合后细胞的类型？ AA、AB、BB 6.动物细胞融合的原理？ 细胞膜的流动性 灭活：是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 动物细胞融合技术的意义和应用 比较 项目 原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物 体细 胞杂 交 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、 电刺激、 振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 动物 细胞 融合 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 获得杂 种细胞、制备单 克隆抗体 比较动、植物细胞杂交技术 细胞膜的 流动性和植物细胞全能性 细胞膜的流动性 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ） 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B B A 温顾知新 1.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 问题？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 3.如何得到抗体？ 分布在体液中 从动物血清中分离所需抗体 2.抗体分布在哪里？ 4.传统的抗体生产办法及缺陷是什么？ 强调： 效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，课本将其简称为B淋巴细胞。 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 单克隆抗体 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，即克隆。 单克隆抗体的概念 单克隆抗体（概念）： 单个B淋巴细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 提示1：体外培养B淋巴细胞能无限增殖吗? 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 问题：如何大量生产单克隆抗体？ 单克隆抗体的制备 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞 融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 ①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ ② 会有几种融合方式？ ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ ④ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？ BB 、B瘤 、瘤瘤 （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B淋巴细胞