人教版高中生物选修1专题2　微生物的培养与应用《课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》（45张ppt） （共45张PPT）.ppt

设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 ㈢.设置对照： 设置对照的方法： 空白对照：不给对照组任何处理因素。 条件对照：给对照组施以部分实验因素，但不是所要研究的 处理因素。 自身对照：对照组和实验组都在同一研究对象上进行。 相互对照：不单设对照组，而是几个实验组相互对照。 　A同学的结果与其他同学不同，可能的解释有两种。 一是由于土样不同； 二是由于培养基污染或操作失误。 实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落，但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。 原因：⑴土样不同， ⑵培养基污染或操作失误(或者是混入了其他的含氮物质) 小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。 方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验 方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。 结果预测：如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。 （一）土壤取样（土壤是天然培养基） （1）取样的位置： 土壤，天然培养基，含有大量的微生物，土壤中70～90％是细菌，细菌适宜在酸碱度接近中性的的潮湿土壤中生长。在富含有机质的土壤层的3～8cm处中分布着绝大多数的细菌。 （2）取样要求：铲去表层土。 注意无菌操作： ◆取土样用的小铁铲和盛土样的信封等用具在使用前都要灭菌。 ◆应在火焰旁称取土壤。并在火焰附近将土样到入锥形瓶并塞好棉塞。 二.实验的具体操作 ㈡.制备培养基： 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。 （三）样品的稀释 注意灭菌： ◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行 之后讲课本P22的最上面内容 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容 讲完后讲P23楷体字部分 讲完后讲P23楷体字部分 课题2 土壤中分解尿素的细菌的 分离与计数 一、课题背景 1、尿素的利用 尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。 2、细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2) 脲酶 + H2O + CO2 NH3 3、常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。 4、课题目的 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 一.研究思路 ㈠.筛选菌株 ㈡.统计菌落数目 ㈢.设置对照 1、实例： 寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。 DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。 (一).筛选菌株： 原因： 启示： 要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；配置合适的培养 基 方法：⑴抑制大多数微生物生长 ⑵造成有利于该菌生长的环境， 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过稀释涂布平板法等方法对它进行纯化培养分离。 2、实验室中微生物的筛选原理： 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 3、选择培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 4、配制选择培养基的依据 根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。 例如：培养基中不加入有机物可以选择培养 微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养 的微生物，加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。 自养型 固氮 15.0g 琼脂 1.0g 尿素 10.0g 葡萄糖 0.2g MgSO4`7H2O 2.1g NaH2PO4 1.4g KH2PO4 5、本课题使用的培养基的配方： ①从物理性质看此培养基属于哪类？ 固体培养基 ②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？ 碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素 培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 4、培养基选择分解尿素的微生物的原理 怎样证明