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人教版高中生物选修1专题2 微生物的培养与应用《课题1微生物的实验室培养》(39张ppt) (共39张PPT)
到目前为止, 几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖 都与微生物学有关 微生物的类群 原生生物: 原核生物: 真菌: 病毒: 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 课题1 微生物的实验室培养 1.提供营养和条件 2.防止污染 一.培养基: 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分: 思考:微生物“吃”什么? 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源: 有机碳源: CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源: 有机氮源: NH4+、NO3-(为硝化细菌提供N源和能源) 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注:含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 一.培养基: 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分: 碳源、氮源、水、无机盐 2.特殊营养: 维生素、碱基等(生长因子) (牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有) 3.pH、氧气的需求: 4.种类: 固体培养基 液体培养基 有无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 化学成分: 物理性质: 天然培养基 合成培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 分析营养构成? 5. 配制原则 ⑴目的明确: ⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值: 有机碳源 异养型: 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型: 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱,真菌偏酸 (CO2碳源) 生产 科研 耐高温需保持干燥的 物品,160~170℃ 1~2小时 接种环、接种针等 金属用具 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 消毒 灭菌 定义 方法 较为温和理化方法, 杀死部分有害菌体 (不包括芽孢、孢子) 强烈的理化方法, 杀死所有微生物 (包括芽孢、孢子) 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌 酒精、氯气、石炭酸等 高压蒸汽灭菌 培养基, 100KPa、 121℃、15~30min 二.无菌技术: 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌: 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 2.无菌范围: 实验操作空间消毒 操作者的手、衣着消毒 实验用具灭菌 实验操作过程 二.无菌技术: 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌: 酒精灯旁操作 超净工作台 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌 细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 单个 或少数菌体 2.特征: 大小、形状、光泽度、 颜色、透明度等。 3.功能: 1.定义: 菌落 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 三.大肠杆菌的纯化培养: ㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算: 培养基用量 依配方计算各成分的用量 2.称量: 3.溶化: 牛肉膏黏稠,用称量纸称取 牛肉膏、蛋白胨易吸潮,要快、加盖 牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解 →取纸 →蛋白胨、NaCl →琼脂 →补水定容 4.调pH、分装、封口: 5.灭菌: 6.倒平板: 培养基、培养皿 分散成单个细胞, 形成单个菌落 倒平板 约50℃ 防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染 灼烧灭菌, 防止瓶口的微生物污染培
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