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人教版高中生物选修三专题二2.2.2《动物细胞融合和单克隆抗体》课件(共17张PPT)
第一步:将 注射到小鼠体内进行免疫; 第二步:从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的 细胞,与小鼠的 细胞在 ,或聚乙二醇的诱导下融合; 第三步:在特定的 培养基中,筛选出 细胞; 第四步:培养杂交瘤细胞,从中挑选出 的细胞群,继续培养; 第五步:将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠 内增殖,然后从 和 中提取单克隆抗体; 【作业布置】 1.复习本章知识,构建知识网络。 * 学习目标 1.动物细胞融合的过程与比较 2.单克隆抗体的制备过程 1.动物细胞融合 过程 诱导因素 2.单克隆抗体 ★用哪两种细胞制备杂交瘤细胞?为什么? ★制备杂交瘤细胞过程中形成几种融合的细 胞?哪种融合细胞才是杂交瘤细胞? ★杂交瘤细胞的特点? ★单克隆抗体制备的过程中两次筛选的目的? 细胞核 病毒颗粒 细胞核 5.为什么用灭活病毒能诱导动物细胞融合? 灭活病毒的特点? 【问题分析一】动物细胞融合 1.原理: 细胞膜的流动性 物理法、化学法、生物法(灭活病毒) 2.诱导动物细胞融合的方法? 3.融合后细胞的类型? 4.杂交细胞?特点? 丧失感染活性,保留融合活性 具有两个细胞的遗传信息,可表现两个亲本的遗传性状。 主要用于制备单克隆抗体 克服远缘杂交不亲和的障碍,获得杂种植株 物理法、化学法 (同左) 生物法:灭活的病毒 物理法(离心、振动、电激) 化学法(聚乙二醇) 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 植物体细胞杂交与动物细胞融合的区别: 用途 诱导方法 细胞融合前的处理方法 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 6.动物细胞融合技术的意义和应用 意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 B淋巴细胞能分泌特异性抗体,但在体外培养的条件下,不能无限增殖 【问题分析二】单克隆抗体 B淋巴细胞特点: 小鼠骨髓瘤细胞特点: 体外培养能无限增殖但不能分泌抗体 2. 选用骨髓瘤细胞与B细胞融合,融合的细胞具有两个亲本的遗传特性,既能分泌特异性抗体又能无限增殖。 1.取材 设计方案: 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖 既能产生特异性抗体,又能大量增殖 动物细胞培养技术 单克隆抗体 动物细胞融合 杂种细胞 3.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体? 骨髓瘤细胞 注射抗原 单克隆抗体 筛选 克隆、筛选 体内培养 体外培养 B淋巴细胞 (选择培养基) (抗体检测) 细胞融合 杂交细胞 1.注射抗原的目的是什么? 2.诱导细胞融合的手段有哪些? 3.若细胞两两融合后,有几种融合情况? 4.怎样筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞有何优点? 5.第一次筛选出的杂交瘤细胞?为何需进行克隆化培养、专一抗体检测? 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 (获得产生相应的浆细胞) 获得足够数量的能分泌特异性抗体的细胞群。 6.大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法? 体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 BB细胞 瘤瘤细胞 杂交瘤细胞 7.两次筛选的目的是什么? ? 第一次。获得杂交瘤细胞 第二次.获得产生单一抗体的杂交瘤细胞 3.制备单克隆抗体: ⑴本过程利用了哪些技术手段? ⑵本过程选用哪两种细胞融合? 4.单克隆抗体优点: 强, 高,产量大。 【问题分析二】制备单克隆抗体 动物细胞融合技术 动物细胞培养 特异性 灵敏度 细胞与 细胞(浆细胞) 骨髓瘤 经过免疫的B 5.单克隆抗体有哪些方面的用途? ①作为诊断试剂(最广泛的用途): 的优点 ②用于治疗疾病和运载药物 (生物导弹的组成?) 准确、高效、简易、快速 “生物导弹”=抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素。(单克隆抗体:导向。准确找到癌细胞位置,原位杀死癌细胞。) 总结:单克隆抗体的制备过程要点: 特定的抗原 B淋巴 骨髓瘤 灭活的病毒 选择 杂交瘤 能产生特异性抗体 腹腔 小鼠腹水 培养液 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B
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