原创精品课件1：2.3 动物细胞工程的应用（Ⅱ）.ppt

B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 5、单克隆抗体的制备过程 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。 杂交瘤细胞有何特点？ 特异性强，灵敏度高 免疫小鼠 培养骨髓瘤细胞 融合 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 选择培养基上培养 专一抗体检验阳性 专一抗体检验阳性 注射到小鼠体内 体外培养 单克隆抗体 克隆杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞 多种杂交细胞 杂交瘤细胞有何特点？ 本过程利用的那些技术？ 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 是否注射抗原 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？几种融合细胞？ 两次筛选的目的分别是什么？ 与传统制备的抗体相比具有什么特点？ 5．单克隆抗体的制备 脾 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 杂交瘤细胞 增殖 产生抗体 克隆化 抗体 体外培养 小鼠腹腔 细胞培养液 腹水 究 探 作 合 1、（只考虑两两融合）融合细胞几种类型？ 2、本过程中进行了两次筛选，目的分别是什 么？第1次筛选要淘汰哪些细胞？ 3、杂交瘤细胞有何特点？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 4.在制备单克隆抗体的过程中，选用哪两种细胞进行融合？为什么选择这两种细胞？ 浆细胞和骨髓瘤细胞 浆细胞能产生单一抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生单一抗体。 究 探 作 合 6．单克隆抗体的应用 (1)优点：_________、_________、产量大。 (2)应用 ①作为诊断试剂，具有准确、_____、简易、_____的优点。 ②用于_________和_________。 特异性强 灵敏度高 高效 快速 治疗疾病 运载药物 纳 归 题 问 生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤） 太空婚礼 境 情 设 创 2002年１２月３０日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。一段时间后，我国首批”太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明，细胞融合率大大提高。 “太空婚礼” 神舟放飞强国梦 “太空婚礼”科研项目一： “太空婚礼”科研项目二： 挑战自我 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 知识回顾 植物体细胞杂交过程 植物细胞 A（番茄） 植物细胞 B（马铃薯） 去除细胞壁 原生质体 A 原生质体 B 原生质体融合 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 脱分化 愈伤组织 杂种植株(番茄马铃薯) 再分化 境 情 设 创 习 学 主 自 1.动物细胞融合的概念 2.动物细胞融合的原理 3.诱导动物细胞融合的方法 4.动物细胞融合的意义和应用 任务：阅读教材第52页 时间：2分钟 问题： 一、动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合:也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 2、原理： 细胞膜的流动性 纳 归 题 问 3.诱导方法： 物理方法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激等 聚乙二醇（PEG) 纳 归 题 问 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 纳 归 题 问 纳 归 题 问 纳 归 题 问 4.意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 5.应用： 最重要的用途是制备单克隆抗体 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动