名校联盟河南省洛阳市中成外国语学校高中生物人教版选修3专题三《27细胞工程》课件.ppt

细 胞 工 程 2013 . 2 . 1 . Z```xxk 考点 动物细胞培养和动物细胞克隆 1．动物细胞培养 (1)流程 幼龄动物组织或胚胎 细胞贴壁生长 单个细胞 细胞悬液 细胞悬液 细胞株或细胞系 ①选用幼龄动物组织或胚胎的原因：它们的细胞分化程度 低，增殖能力很强，更易于培养。 ②进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，不用胃蛋白酶的原因：胃蛋白酶作用的适宜pH 约为 2，当 pH 大于 6时，胃蛋白酶就会失去活性。而胰蛋白酶作用的适宜pH 为7.2～8.4，多数动物细胞培养的适宜 pH 为7.2～7.4，因此胰蛋白酶 适用于细胞培养时细胞间质(主要为蛋白质)的分解。 (2)细胞贴壁和接触抑制 ①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。 ②接触抑制：细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象。 (3)动物细胞培养需要满足以下条件 ①充足的营养供给：微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、 促生长因子、血清等。 ②适宜的温度：36.5 ℃±0.5 ℃。 ③适宜的 pH：7.2～7.4。 ④气体环境 O2：有氧呼吸、细胞代谢(95%的空气) CO2：维持 pH(5%) ⑤无菌、无毒环境：培养液和培养用具杀菌消毒，培养过 程加抗生素杀菌，定期更换培养液，清除代谢产物。 技术 内容 项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的全能性 细胞的增殖 培养基 成分 矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加剂(如甘氨酸、琼脂等)，属于固体培养基 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等，属于液体培养基 取材 较幼嫩的细胞、组织、器官 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 培养过程 培养结果 可以获得植株，也可以获得大量细胞 只能获得大量细胞，不能得到生物个体 应　用 ①植物快速繁殖与脱毒植物培养 ②生产细胞产品 ③制造人工种子 ④用于转基因植物的培育 ①生产蛋白质生物制品 ②培养皮肤移植的材料 ③检测有毒物质 ④用于生理、病理、药理学的研究 zxx````k 相同点 ①都需人工条件下的无菌操作 ②都是合成培养基 ③都需适宜的温度、pH等条件 特别提醒：①植物组织培养需要生长素和细胞分裂素，其中生长素可诱导愈伤组织生根，细胞分裂素可促进愈伤组织生芽。 ②在动物细胞的传代培养中，细胞可能癌变。 ③两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。 ④植物组织培养最终产生新个体，体现了细胞的全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现细胞的全能性。 1．原理：动物细胞核的全能性。动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2．供核细胞：一般选优良动物的传代培养10代以内的细胞。 3．受体细胞：去核的MⅡ期卵母细胞。 4．过程 5．在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到(　　) A．细胞培养技术 B．细胞核移植 C．胚胎移植技术 D．基因工程技术 解析：克隆技术需利用核移植以产生重组细胞，重组细胞经细胞培养形成早期胚胎后，需移植到母体子宫发育成个体。 Z```xxk 答案：D 植物体细胞杂交 动物细胞融合 (单克隆抗体制备) 理论基础 (原理) 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 酶解法(纤维素酶、果胶酶)去除细胞壁 注射特定抗原使正常小鼠产生免疫反应 促融方法 ①物理法：离心、振动、电刺激等；②化学法：聚乙二醇(PEG) ①物化法：与植物细胞融合相同；②生物法：灭活的病毒 过程 第一步 原生质体的制备(酶解法) 正常小鼠免疫 处理 第二步 原生质体融合(物化法) 动物细胞融合 第三步 杂种细胞的筛选与培养 杂交瘤细胞的 筛选与培养 第四步 杂种植株诱导与鉴定 单克隆抗体的 提纯 意义和用途 ①克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围； ②突破有性杂交的母系遗传，获得细胞质基因的杂合子，研究细胞质遗传 ①制备单克隆抗体； ②诊断、治疗和预防疾病，例如：a.肿瘤定位诊断,放射性→肿瘤；b.生物导弹治疗,抗体→抗癌药物→肿瘤