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2018年高中生物同步课件:31酶的制备及活力测定中图版选修1共31张PPT
栏目导引 新知初探思维启动 要点突破讲练互动 知能演练轻巧夺冠 第三章 酶的制备及应用 第三章 酶的制备及应用 第三章 酶的制备及应用 第1节 酶的制备及活力测定 学习导航 1.研究酶的存在及提取方法。[重点] 2.尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。 [难点] 新知初探思维启动 一、酶的存在及影响因素 1.合成场所:在生物体活细胞中合成。 2.反应部位:多数在_______直接参与生物化学反应,少数在________发挥作用。 3.影响因素:_______________等多种环境条件都可能影响酶的__________,导致酶变性,直至丧失活力。 细胞内 细胞外 温度、酸碱性 空间结构 判一判 (1)人体内、参与物质分解的酶都可以在分泌物中提取。(×) (2)高温、低温、过酸和过碱等环境条件都能改变酶的空间结构,导致酶变性失活。(×) (3)新采摘的甜玉米放在沸水中浸泡后,可使甜味保持的时间长些。(√) (4)萨姆纳第一次证明了脲酶是蛋白质。(√) 二、酶的活力及测定方法 1.酶的活力:以单位时间内_______________或者在单位时间内_______________来表示。 2.酶活力的测定 (1)方法:利用______________进行比色。 底物的消耗量 产物的生成量 分光光度法 (2)实例 ①植物淀粉酶的制备及活力测定 使酶失活 钝化酶的活性使反应终止 3,5-二硝基水杨 酸试剂 煮沸 黄褐色 520m 想一想 进行酶活力测定时,出现了“恒温处理”、“沸水加热”、“钝化处理”,是否矛盾?各有什么目的呢? 【提示】 不矛盾。恒温处理是为酶促反应提供必要的温度条件,与之形成对照的是经沸水浴加热变性失活的酶液,而钝化处理是使反应后的酶失活,使反应终止。 ②过氧化氢酶粗酶液的制备及活力测定 a.制备过氧化氢酶粗酶液 以新鲜动物肝脏、马铃薯块茎或萝卜块根为材料,经过切碎、研磨、_____,取_______即可得到过氧化氢酶粗酶液。 离心 上清液 b.分光光度法测定过氧化氢酶的活力 在过氧化氢酶存在时,过氧化氢将_________氧化生成_____色产物。待酶反应终止后,过滤,取滤液适当稀释,在波长_____ nm处测吸光值,计算出过氧化氢酶的活力。 愈创木酚 茶褐 470 c.高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力 过氧化氢酶可以催化H2O2分解为水和氧。如果在反应系统中加入适当过量的过氧化氢溶液,经酶促反应后,在酸性条件下,用标准高锰酸钾溶液滴定多余的______,反应如下: 5H2O2+2KMnO4+4H2SO4―→5O2+2KHSO4+8H2O+2MnSO4 H2O2 H2O2的量 要点突破讲练互动 要点一 粗酶液的制取 1.胞内酶(绝大多数酶,如呼吸酶、淀粉酶、过氧化氢酶等):用破碎仪、研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎,然后过滤、离心。 2.胞外酶(消化酶等):直接从动物分泌物或组织间隙中提取。 H2O2酶粗酶液的制备过程中叙述错误的是( ) A.以新鲜动物肝脏、马铃薯块茎或萝卜块根为材料 B.材料需要破碎、过滤和离心处理 C.取上清液即可得到粗酶液 D.粗酶液需要钝化处理保存 例1 【解析】 H2O2酶分布于很多组织细胞中,可有效地去除H2O2的危害,它属于细胞内的酶,所以要进行破碎或研磨,然后过滤、离心。但钝化处理是使酶失去活性的方法,不是保存方法。 【答案】 D 互动探究 (1)如果换成胰蛋白酶的制备,具体方法又是怎样? (2)从哪些方面考虑酶液的保存? 【提示】 (1)细胞外的酶可直接从分泌物中提取。 (2)酶液保存应考虑影响酶活性的因素,如低温、适宜pH等条件。 要点二 影响酶活力的因素 1.温度 酶活力随温度的变化而变化的趋势可用图示表示: (1)温度从t1到t时,随着温度的升高,酶活力逐渐增强。 (2)温度从t到t2时,随着温度的升高,酶活力逐渐降低。 (3)温度高于t2时,酶活力全部丧失。 (4)t3、t4条件下,酶活力相同。 (5)t为最适温度,即在该温度时,酶的活力最强。 2.pH 每种酶都有一定的最适pH范围。例如:过氧化氢酶最适pH范围为6.8~7.3。过酸、过碱都会使酶发生不可逆失活。 3.酶的激活剂 有时加入酶的激活剂可以提高酶活力。 4.酶的抑制剂 加入酶的抑制剂后可以降低酶活力,甚至使酶失去活力。 特别提醒 酶活力的高低受温度、pH、激活剂等多种因素的影响,所以酶的提取一般选择在低温和适合的pH下进行,有时还要加入酶的激活剂以提高酶活力。 胰蛋白酶作用于一定量的某种物质(底物),温度保持在37 ℃,pH保持在最适值,
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