运动心脏重塑过程中大鼠左室肌蛋白质组差异表达的研究-运动人体科学专业论文.docx

摘要目的：蛋白质是生物体功能的执行者，运动心脏的重塑、病理心脏的变化均源于蛋白的改变，且两者之间具有本质区别。本研究从蛋白质组学整体、定量的角度，探讨中等强度运动过程中，大鼠左室肌蛋白质组的差异表达及其规律，初步筛选在运动心脏重塑中发挥重要作用的目标蛋白质，为揭示运动心脏重塑的机制提供新的依据，为慢性心血管疾病的运动康复或辅助治疗提供新的借鉴。方法：以54只雄性SD大鼠为研究对象，按体重随机分为实验组和平行对照组(各3组，每组n=9)。实验组经4、8和12周中等负荷(70-80％V0：m双)跑台训练后6h，与平行对照组同时麻醉处死，计量大鼠心重，提取左室肌组织的全蛋白样品。采用双向凝胶电泳进行蛋白样品分离，采用PD-@uest软件进行图像分析和数据采集。选择运动后差异表达量≥lO倍的点作为备选目标蛋白点，进行胶内原位酶解与一、二级质谱鉴定。结果：经4、8、12周运动后，实验组大鼠心重指数分别增加18．5％、34．5％与36．6％(仄O．05)。4周实验组和对照组分别检测到584___23和555±33个蛋白点，差异表达量≥10倍的点共13个，运动后上调4个，下调9个；8周为499±29和495±26个，蛋白质差异表达量≥10倍的点与第4周同；12周为578±27和587±26个，差异表达量≥10倍的点共有4个，全部表现为新出现的上调点。取17个差异点中的5个备选目标蛋白点，经一、二级质谱鉴定出葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、烯酰辅酶A水合酶(ECH)和ATP合酶a亚基等3种运动后上调的蛋白质，及运动后下调的ATP合酶偶合因子6(CF6)和一个分子量为116kDa的未知蛋白。结论：①经12周中等强度负荷运动后，实验组大鼠的心脏增大。②实验组大鼠在心脏重塑过程中，左室肌蛋白质组在4周运动后发生显著性差异表达，8、12周运动后蛋白质组出现适应性变化。③采用中等强度运动进行心脏重塑，可使心肌能量代谢水平提高、心肌应激反应与适应能力增强、血压调节能力改善，运动大鼠心脏出现良好的适应性变化。④筛选出在运动医学领域中尚未涉足的葡萄糖调节蛋白78、烯酰辅酶A水合酶、ATP合酶a亚基与ATP合酶偶合因子6等4种目标蛋白，为深入研究运动心脏奠定了前期工作基础。；关键词：运动心脏；左室肌；中等强度运动；蛋白质组；差异表达AbstractObjective：Theproteinistheexecutantoftheorganismfunction，theathleticheartremodelingandthepathologyheartchangescomeofthechangesoftheprotein，andthereisanessentialdifferencebetweenthem．ourstudyprobedintothedifferentialexpressionandthelawoftheleftventricularmuscleproteomeduringtheprogressofthemediumintensityexercisefromthesightofquantitativeandqualitative，andseekingouttheobjectiveproteinswhohadasignificantfunctionduring the progress of the athletic heartremodeling，andprovidingnewgistsfordiscovering themechanismoftheathleticheartremodeling，andproviding referenceforthesporthealingortheadjunctivetherapyofthechroniccardiacdisease．Methods：Using54maleSDratsasourstudyobject，anddividingthemintoexerciseandparallelcontrolgroupsaccordingtotheiravoirdupois(each3groups，n=9)．Theexercisegroupswerekilledafteranaesthesiatogetherwiththeirparallelcontrolgroupafter4，8and12weeksmediumintensity(70—80％V02懈)trainingrespectivelyafter6hatthelasttraining，weighingheartofeachrat，preparingforwholeproteinsamplesoftheleftventricularmuscle，andsepa