辛伐他汀及缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究-生理学专业论文.docx

河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生答辄母吁导雾：繇曰沪ff年户玛÷6日万方数据目录中文摘要1英文摘要4英文缩写9研究论文辛伐他汀及缺血后处理对大鼠。肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究前言日U吾10lO材料与方法11结果一．15附图17附表23讨论25结论28参考文献28综述31致谢：一43个人简历44万方数据中文摘要辛伐他汀及缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究摘要缺血再灌注损伤(ischemiareperfusioninjury，IRI)是指组织或器官经过一段时间缺血，当恢复血流再灌注后，其细胞功能代谢障碍及结构破坏反而较缺血性损伤进一步加重的现象。肾缺血再灌注损伤(renalischemiareperfusioninjury，RIRI)是临床上常见的病理生理现象，是多因素参与的复杂的病理过程，也是急性肾损伤的主要发病机制之一。急性肾缺血再灌注损伤与ATP的减少、大量氧自由基的生成、细胞内钙超载、炎性介质和粘附分子产生过多、一氧化氮(N0)合成减少和内皮素(ET)释放增多等因素有关。辛伐他汀属于水溶性他汀类药物，是一种天然化合物，为无活性的内酯，在肝脏羟化成B一羟酸等活性抑制物而发挥药理作用。通过对HMG．CoA特异性抑制作用，使HMG—CoA不能转变成甲羟戊酸(Mevalonate，MVA)，从而阻断胆固醇的合成，降低血胆固醇的水平。他汀类药物问世以来，已广泛应用于临床治疗高脂血症。近年研究发现，他汀类药物尚具有强大的非降脂作用。这种非降脂作用也被认为是他汀类药物的多效性(Pleiotropiceffects)，主要包括，提高一氧化氮生物利用度、改善内皮功能、抗氧化应激、抗炎、抑制细胞外基质聚积、降低血管平滑肌细胞的迁移和增殖以及免疫调节等。缺血后处理(ischemicpostconditioning，IPO)是指对缺血组织或者器官实施供血重建之前进行反复多次短暂的缺血／再灌注，可以有效减轻供血重建后的缺血再灌注损伤。近年来，国内外对肝、脑、心脏以及肢体缺血后处理进行了较多的研究，各种研究结果均表明缺血后处理对IRI具有保护作用。肾脏对缺血缺氧较敏感，易发生IRI，但有关IPO对肾脏IRI的保护作用及作用机制，目前少有报道。本实验旨在应用生理、生化及免疫组织化学等方法观察辛伐他汀及缺血后处理对RI砒的作用，并探讨其可能的作用机制。目的：观察辛伐他汀及缺血后处理对RIRI的保护作用，并探讨其可能万方数据中文摘要的作用机制。方法：采用夹闭双侧肾动、静脉45分钟后松夹再灌的方法制作褂Rj模型，观察辛伐他汀及缺血后处理对大鼠mⅪ损伤的影响。成年健康雄性Sprague．Dawley(SD)大鼠40只，体重180～2209，在l8．22℃实验室安静饲养两日后，将大鼠随机分为5组，分别为：①假手术组(Sham)、②溶剂对照组(Sham+V)、③缺血再灌注组(I瓜)、④辛伐他汀组(Sire)、⑤缺血后处理组(IPO)。动物分组后，Sim组每日给予辛伐他汀20mg／kg灌胃，1次／d，Sham组每日给予等容量生理盐水灌胃，持续2周。2周后复制RIRI动物模型。大鼠术前禁食12h。1％戊巴比妥钠腹腔麻醉后固定于操作台，腹正中切口打开腹腔，游离双侧肾动、静脉。I／R和Sim组均用无创动脉夹夹闭双侧肾动、静脉45分钟，然后去除动脉夹，观察双侧肾脏颜色由暗紫红色变为鲜红色，表明再灌注成功，逐层缝合腹膜，腹壁肌肉和皮肤。IPO组用无创动脉夹夹闭双侧肾动、静脉45分钟去除动脉夹，后行6个循环夹闭10s／再灌10s后处理。Sham和Sham+V组只开腹不夹闭肾动、静脉，其余操作同上。各组动物再灌注24h后取腹主动脉血，测定血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)。取血后迅速摘取双侧肾脏，测定肾组织丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的含量。酶联免疫分析法(ELISA)检测肾组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的含量。免疫组化法测定肾组织Bcl．2、Bax及HO一1 的表达。肾组织病理形态学观察肾损伤程度。结果：1Sham组和Sham+V组大鼠肾小管未见明显异常。I／R组肾小管明显受损，以近曲小管为重，表现为肾小管上皮细胞混浊肿胀，管腔明显扩张，管内可见管型和脱落细